B型肝炎部分患者为何带病毒却自己不发病但传染给他人？

邓文龙

B型(乙型)肝炎部分患者为何带病毒却自己不发病但传染给他人？

发表日期:2009-3-17

（原创）

我上医科大学是多年前的事了。大学时代老师和书本教了我们不少医学知识，但是时间长了，有些知识也还记得但也模糊了，有些知识也老了，但是我根据我现在的记忆并包括我在网上得到的最近的一些知识，大体上我是这样一个看法：其实，肝炎甲型（A型）的也好，乙型（B型）的也好，现在还有C型，都有传染性。这里A型肝炎属于经由口进行传播，经过食物，经过口腔、消化道传播，发病也比较急，它是RNA病毒，病程比较短，愈后比较好；C型肝炎也就是丙型肝炎，讨论的比较少；而临床上比较多见，也比较棘手的，大家也比较关心的就是B型肝炎。B型肝炎是通过血液和体液进行传播的，它是DNA病毒。血液也就是打针，像我们以前中国的话，针头是煮沸消毒的，但有时不可能把所有的病毒都杀死，所以现在根据统计，3个当中有1个，中国的乙型肝炎的病人平均约有30%左右是通过打针传播的，还有吸毒、母体转播。吸毒也是打针，母体转播就是母亲有肝炎，就传给了婴儿。还有性生活，还有其他一些有体液交换的各种各样的接触，通过体液和血液造成乙型肝炎的传播。甚至于指甲刀，乙型肝炎病人用过的指甲刀也传染，还有剃须刀，原来用过的人是急性肝炎病毒携带者，里边残留了病毒，用时造成皮肤破损的话就感染了乙型肝炎。乙型肝炎目前为止治疗是比较困难的，没有办法直接杀死病毒。现在有各种各样的药，像干扰素效果好一些，因为它能免疫激活起到清除病毒的作用。还有其他的方法也有，比如急性期用抗病毒药物治疗如用α-干扰素或干扰素诱导剂聚肌苷酸及丙种球蛋白，慢性乙肝可用口服抗病毒药物抑制病毒复制、自血细胞增数培养回输治疗等几种治疗方法。很多的治疗方法，但是目前都不太理想，都不能彻底的消灭乙型肝炎的病毒。我们从科学的角度来说，病毒是一种一类非细胞形态的介于生命与非生命形式之间的物质，它自己是不能够繁殖的，它要寄生在活细胞里边，包括真菌，包括人和其他动物等的细胞里，借别的动物的细胞进行繁殖，如果把病毒杀死就是把活的细胞也杀死了，后果很严重，失去了治疗的价值，所以治疗很困难。像病毒引起的艾滋病也好，其他病毒类疾病治疗都很困难。未来也许能够发明出彻底治疗病毒类疾病的药物，至少目前还没有特效药。所以一般像乙肝患者急性期大部分要静卧、保肝，进行休养，自己慢慢恢复，慢性期等口服抗病毒药，当然也有用疫苗和像干扰素等临床药物。现在临床治疗药物很多（中药也有），有一点治疗或预防效果，但是治愈的特效药目前还没有。


（乙肝示意图3张转来自互联网）：














这里有个奇怪的问题，乙型肝炎如果一个人的抵抗力强发病就比较重，一个人抵抗力中等，发病程度也是中等，如果抵抗力弱的话反而不发病了，只是自身带病毒，而不发生乙型肝炎。这个问题有些教科书里也说了，今天我们再探讨这个问题。乙型肝炎是DNA病毒，如果一个人免疫力很强的话，病毒在肝脏里进行复制时，我们人的免疫系统就认出来肝细胞已经被感染了，这肝细胞就有抗原，有乙肝这样的病毒在繁殖着。免疫系统就认为这个细胞是个坏细胞，免疫系统就开始攻击这个肝细胞，把它砸碎，把它破坏了，引起肝细胞的破裂，肝细胞里的转氨酶等各种各样的物质就流到外边了，使血液里的转氨酶上升，使肝的解毒功能及其他功能受到损害，出现一个比较明显的肝炎症状。但是抵抗力中等的情况，发病就轻一些，不是很强烈，处于中等状态，破坏的肝细胞不是很多。但是当抵抗力弱的时候反而自己身体不发病了，免疫系统不攻击自己的肝细胞，乙肝肝炎病毒继续在肝脏细胞里繁殖，血液里也有病毒，会传给别人，这时有人使用他的物品，把他的血输给别人，他的体液输给别人，比如拔牙的时候血溅到别人身上，如果有破损的地方就钻进去，就有可能成为传播的途径。比如前面说的指甲刀，剃须刀，性的交往，身体的密切接触都会使病毒携带者把病毒传给其他人。B型肝炎病人和病毒携带者，在中国大概在10%左右，10个当中有1个生过肝炎或者带有病毒，发病率非常高。卫生防疫好点的国家，像日本欧美比例少点。并因为通过打针传播，通过其他体液传播的几率会少一点，发病率会低一些。

为什么会出现抵抗力弱不发病，这里边有一套生物学、进化论的理论。我在大学时代曾经看过美国顶尖级科学杂志上发表的文章，科学上大体上是这样解释的：人类有23对染色体，有22对常染色体，还有1对性染色体，性染色体男人和女人是不一样的，男人是XY，女人是XX。根据这个理论，X染色体上大概有200个基因，200个基因里边其中有一部分是为了免疫系统编码的，比如说编码一些抗体的，这些编码是在X染色体上，因而女性体内很可能有双份的某些免疫基因，导致女性体内存在双倍的免疫物质如抗体、T淋巴细胞、B淋巴细胞等。即也就是说在X染色体比较多、表达比较强烈的情况下，比如女性是2条X染色体，它就表达的机会比较多，生成抗体等的机会也会比较多。这也是女性的平均寿命要比男性长5到8岁的主要原因之一（因女性有两个X染色体致女性体内很可能存在双倍的免疫物质而致女性抗感染能力强等）。现在还没有看到临床报道，至少我自己现在还没有看到关于急性肝炎是不是有女性比较多的文献？但是男的免疫力比较低，即男人免疫力会比较低一点，女人会比较强一点，这应该是事实，所以我至少可以推论乙型肝炎带病毒者男性比例会高一些，因为男性的抵抗力差一些，女性比较强。是不是有这样的临床统计资料？我手边没有这样的资料，但是理论上推论是男人免疫力比较低，带病毒的男人的数量应该比女人多。这种免疫性女性比男性强的情况常常在其他一些疾病也可以看到，比如说肺炎，由细菌引起的感染型肺炎一般男人比较多，因为男人的免疫力比较低，对肺炎细菌的抵抗能力比较差，所以老年男病人死于肺炎、其他病并发感染的也不少。肺结核也是一样，总之瘦弱的、抵抗力比较差，得肺结核的多一些。(故医学上可通过一些方法适当提高男人的免疫力以延长男人寿命、以达男人健康长寿。) 还有一些自身免疫系统的毛病，免疫功能过强、免疫功能混乱的一些毛病，比如说风湿性心脏病、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、全身性红斑狼疮、重症肌无力等内脏及皮肤方面的免疫性疾病等，总是女人比男人多，有时会多好几倍，3倍、5倍的都有，并治疗也比较困难。这也可以认为女性因为有2条X染色体，有更多的免疫系统编码的基因，有更多产生抗体的基因，有更多为淋巴细胞等配备的基因，故对入侵身体之物的攻击力较强，也即其自身免疫的攻击力比较强，所以造成上述免疫性疾病等一系列毛病。

为什么女子得自身免疫系统疾病的人比较多？刚才说的这个理论，那怎么会配备2条X染色体给女人呢？科学上的解释是，在远古时代，从无性生殖变成有性生殖的时候，尤其是进化到哺乳动物时，雌性动物在怀孕时免疫力会下降，就必须配备更多的为免疫系统编码的基因，当怀孕的时候免疫系统下降时，一定程度的下降身体还有足够强度抵抗细菌等微生物的能力，而进化配备了2条X染色体给女人。细菌也好，病毒也好虽然没有头脑，但从生物的角度来看，它们要繁殖，要杀死人类和其他生物来统治世界，要占有所有活细胞为它进行肆无忌惮的繁殖。进化就要求人类有足够强度的力量抵抗细菌，杀死细菌等。那雌性动物怀孕的时候的免疫力、抵抗力为何下降呢，原因是为了要保护胎儿，不让胎儿受到母体免疫细胞的攻击，所以就要下降，下降到还能抵抗细菌的程度、抵抗外来微生物侵袭的程度。所以女子在不怀孕的时候，体内免疫系统比较强烈，免疫细胞比较多，抵抗力比较强，一旦发生混乱的时候，自身的免疫系统攻击自己的肾脏、血管、皮肤以及关节等，引起自身免疫系统疾病。治疗自身免疫系统疾病，可以从抑制与免疫相关基因的表达及开放等，降低些身体内免疫系统功能着手。

人类生活在周围充满微生物的世界里，正常一个成年人的体内细菌、微生物的数量根据最近的一些科学报告说，一个普通人体表、体内细菌和其他微生物总数居然大概有一百万亿个到一千万亿个，而人类细胞的总数是一百万亿个，这些微生物主要在大肠和小肠里，另其他部位也有，如口腔、食管、皮肤等到处都有。最近统计人类体内大概有四千到五千个菌种。因为繁殖的快，根据科学统计，以一个大肠杆菌为例，分裂一次大概为20分钟，1小时可分裂3次，刚开始有1个细菌，经过10个小时就变成10亿个大肠杆菌了。这个是理论数据，能不能分裂到10亿个有时候还要受到原料的限制，环境里酸碱度的改变，分裂过程中废物的增加，也许达不到，但理论上一个大肠杆菌通过10个小时繁殖，就可以达到10亿这个天文般的数字。既然人身体中细菌等数量与人类细胞总数相当，也有论文说可比人类细胞多到约10倍左右，那人体必定需要足够强大的抵抗力。所以人类体内有很多免疫系统的基因，这些基因如果强烈表达的话使得身体产生强烈免疫能力，杀死入侵体内部之细菌以及中和病毒。人有各种各样杀死真菌、细菌等、杀死微生物的能力。当杀死微生物等能力强的时候，当肝脏细胞被乙肝病毒感染的时候，肝脏细胞会被免疫系统攻击，肝脏细胞破裂、死亡，出现肝炎症状等，如黄疸、转氨酶上升、身体软弱、肝功能下降。当抵抗力中的时候，反而发病比较轻，一部分肝脏细胞没有受到攻击还能正常工作，当你抵抗力弱的时候，人体免疫系统不攻击受感染的肝细胞，肝和病毒就相安无事，共同生存，病毒在人体里繁殖，虽然成为带病毒者(可传染给他人)、危险人物，但他自己却没有发病。所以部分乙型肝炎为什么带病毒但是自身不发病，只传染给别人，就是基于以上的理论。而通过用药物抑制乙肝病毒在肝脏细胞中复制生产等以治疗乙型肝炎。

最近几年，科学技术在不断发展，科学知识在不断更新，我相信有更多的和更深的知识，如果说有学者专家知道这方面的进展或者有这方面知识，欢迎来补充和讨论。如果说我的观点有什么不妥之处，可以加以修正，如能得不吝赐教，则幸甚也！

(小徐614 对本文亦有贡献)

旅行家

B型肝炎（維基百科）：

http://zh.wikipedia.org/zh-tw/B%E5%9E%8B%E8%82%9D%E7%82%8E

慢性B型肝炎（ 百度百科）：

http://baike.baidu.com/link?url= ... eqfGaY5qoNSJxO32JUa

旅行家

肝病学 Hepatology：揭示乙型肝炎的进化旅程

2012-10-12 2:05:38

2012年10月12日 讯 /生物谷BIOON/ --近日，一项刊登于国际杂志Hepatology上的研究报告揭示了，乙型肝炎的传播扩散如何与人类迁徙的历史相关，这就为我们更好地理解乙肝病毒的进化提供了思路。

乙型肝炎是全球的健康问题，目前全世界有将近20亿人感染了乙肝病毒，有超过3.5亿人属于携带者。目前许多言论认为个体感染乙肝病毒和其迁徙历史有关，但是截至目前并无可靠证据证实。

这项研究就揭示了HBV（乙肝病毒）在过去40，000年中的迁移模式。研究者分析了古老人群HBV感染的扩散情况，并且分析了病毒的进化历史和人类遗传多样性的关系。他们发现HBV基因型的分配与史前现代人类的迁移有关。

研究者Gkikas Magiorkinis教授说，理解病毒来自哪里至关重要，因为它给了我们一个基本框架，用来解释病毒如何进化以至于对于人类具有危害性。理解感染性疾病的出现和传播对于我们的研究非常重要。

http://onlinelibrary.wiley.com/journal/10.1002/(ISSN)1527-3350

顾汉现

作者：蓝柯等 来源：《病毒学杂志》

发布时间：2014-1-15 15:23:00

慢性乙肝治疗性疫苗研究获突破

14-1月13日，记者从中科院上海巴斯德研究所获悉，该所研究员蓝柯课题组在慢性乙肝治疗性疫苗研究中取得新突破。相关论文在线发表于《病毒学杂志》上。

在乙肝慢性感染过程中，针对病毒特异的效应细胞通常处于耐受或耗竭状态，主动免疫能够暂时性激活效应T细胞，但特异性免疫和免疫记忆反应很快恢复到病毒持续性感染形成的免疫耐受状态。因此，研究人员提出一种基于外源性抗原T细胞应答的免疫治疗概念，设计构建了一种重组乙肝病毒（rHBV）。rHBV激活的外源性T细胞应答将最终控制野生病毒的持续性感染。

在蓝柯和副研究员邓强的指导下，博士生王卓等人利用重组腺病毒载体携带rHBV，证实能够有效转导并稳定产生野生乙肝病毒的肝细胞系，被携带的rHBV相对于野生病毒具有显著的复制优势；同时，应用原代培养树鼩肝细胞证实，rHBV子代病毒具有感染性。研究结果极大增加了rHBV重组腺病毒载体的抗病毒效应。

此外，研究人员还建立了基于腺相关病毒载体的乙肝慢性感染小鼠模型，并应用rHBV重组腺病毒的主动免疫治疗清除小鼠模型中乙肝慢性感染，实现乙肝病毒抗原的血清转换。专家认为，这项研究体现了打破免疫耐受、清除慢性乙肝感染的有效治疗策略。（黄辛）

更多阅读

《病毒学杂志》发表论文摘要（英文）:

http://jvi.asm.org/content/early/2013/12/20/JVI.02756-13.short

顾汉现

饶毅的个人博客

http://blog.sciencenet.cn/u/饶毅

博文

肝炎研究的突破与科研体制的改革

2012-11-16 17:45

个人分类:科学|系统分类:科普集锦|关键词:肝炎

2012年11月13日，新的生物学刊物eLife发表论文：中国科学家攻克了一个长期困扰国际科学界的难题，而这一基础科学问题也与人类、特别是中国人民的健康相关。

过去，世界和中国忽略了1980年代我国科学家在条件艰苦时代做出重要贡献，我们赞叹广西肿瘤防治研究所的严瑞琪和苏建家等、北京第二传染病院的余昌晏等和中国医学科学院的庞其方等建立乙肝动物模型；

现在，我国已经有条件和能力改革科学管理体制机制、提供适当环境，让一些科研机构年富力强的科学家心无旁骛，如北京生命科学研究所的李文辉带领学生和同事发现乙肝病毒受体；

将来，希望全国科研机构能推广适合各个学科和机构自身规律的体制机制改革，使大批年轻人集中精力在专业上充分发挥作用，他们大有作为才能使中国的科学大有希望。



肝炎和肝炎病毒

肝炎在全世界有广泛的危害，中国人群肝炎患病率尤其高。多种病毒导致病毒性肝炎：甲、乙、丙、丁、戊（A、B、C、D、E）等。

全球二十亿人曾感染乙型肝炎病毒（HBV），慢性乙肝感染超过3.5亿人。即使在乙肝疫苗已经研制成功多年以后，我国还有逾九千万人感染过乙肝病毒，上千万乙肝患者，每年感染超过百万。

肝炎不仅本身给患者带来折磨，慢性肝炎更是经常转变为肝癌、肝硬化。全球超过50%的肝癌继发于肝炎，超过50%的肝硬化继发于肝炎，每年约七十万人死于病毒性肝炎及其继发疾病。

在人类研究乙型肝炎的历程上，英国医生MacCallum(1946)首先认识到乙肝不同于甲型肝炎，前者通过血液和体液传染，后者通过食物和水传染，它们的病原都小于细菌。1967年，Saul Krugman等可以明确区分甲型和乙型肝炎。1960年代，美国科学家Baruch Blumberg在研究血友病和白血病的过程中（Blumberg, 1964），发现“澳大利亚抗原”（澳抗）(Blumberg et al., 1965)。起初知道与多次输血有关，到1967年发现一例唐氏综合症（先天愚型）患者开始没有澳抗，后来产生澳抗，而且患了肝炎（Blumberg et al., 1967），并在血液中出现病毒样颗粒（Bayer et al., 1968），从而意识到澳抗可能与乙肝更相关。

纽约血液中心病毒研究室的Alfred Prince与韩国合作者从输血导致的肝炎病人中寻找抗原（Prince et al., 1964; Chung et al., 1964），发现了他称为SH（血清肝炎）的抗原与病毒性肝炎相关(Prince, 1968)。日本东京大学医院输血科的Okochi和Murakami于1968年发现输血病人中病毒性肝炎与澳抗有一定、但非绝对相关性。Prince于1968年在《柳叶刀》报道澳抗与SH抗原相同。

其后几年，Blumberg与Prince各自开展一系列工作获得更多证据表明他们发现的抗原与乙肝相关（Blumberg, 1971；Prince，1971）。1970年，英国的Dane等在澳抗阳性的肝炎患者血液中分离获得病毒颗粒，并用电子显微镜观察，确定澳抗是乙肝病毒颗粒的表面蛋白质（乙肝表面抗原，HBsAg）。

1976年，Blumberg获诺贝尔医学奖。

1979年，法国的Galibert等克隆了乙肝病毒的基因组DNA；它很短，不过约三千二百碱基对。整个病毒的DNA短于人体很多单个基因的长度，却能肆虐人类，令人惊讶。

丁型肝炎（HDV）的发现起始于1977年意大利的胃肠科医生Mario Rizzetto在HBV感染病人肝细胞中发现的一个新抗原(Delta抗原，HDAg)（Rizzetto et al., 1977）。其后，他们与美国分子病毒学家John Gerin等证明HDAg来源于一种新型肝炎病毒--HDV（Rizzetto et al., 1980；Rizzetto, Purcell and Gerin, 1980；Rizzetto et al., 1981）。HDV的全基因组于1986年被克隆（Wang et al., 1986）。HBV和HDV两病毒同时感染时，病情严重很多，且更容易导致慢性肝炎。HDV依赖于HBV提供的包膜蛋白（包括HBsAg在内三种）组成病毒颗粒，HDV复制的其它步骤独立于HBV。HBV是DNA病毒，HDV是RNA病毒，它们的基因组不同。



基因工程生产乙型肝炎疫苗

研究乙肝病毒直接导致生产预防乙肝感染的疫苗，是基础研究很快走向为人民服务的一个成功范例。

1971年Krugman开始研制乙肝疫苗。1978年有两个成功的疫苗（Purcell and Gerin, 1978; Hilleman et al., 1978），1980年通过临床验证（Szmuness et al., 1980）。这些疫苗都用来自于病人血浆提取的HBsAg，如果灭活不彻底，反而可以引起疾病。

1979年，旧金山加州大学（UCSF）的William Rutter实验室用现代分子克隆方法，获得HBsAg的基因（Valenzuela et al., 1979）；1981年他们将人的HBsAg转到大肠杆菌中表达蛋白质（Edman et al., 1981）；1982年他们成功地将HBsAg转基因到酵母细胞表达，并获得病毒样颗粒（Valenzuela et al., 1982）。他们申请专利并与Merck公司合作，于1984年成功地用酵母表达的HBsAg作为疫苗，获得保护性的免疫作用，在猩猩中证明疫苗可以预防乙肝病毒侵染（McAleer et al., 1984）。他们的疫苗于1986年获得美国食物药品管理局（FDA）批准后上市。从此，这一基因工程制造的疫苗为世界上很多人提供了预防的方法。在乙肝曾经肆虐的我国台湾，使用乙肝疫苗后，乙肝和肝癌发病率直线下降。原华盛顿大学教授、当时Merck公司的总裁Roy Vagelos决定将一条生产线送给中国并培训中国技术人员使用生产线，中国得益于赠送的生产线制造乙肝疫苗，造福中国民众。

全面接种乙肝疫苗可以使乙肝大幅度下降。不过，由于我国乙肝感染基数庞大等多种原因，还不断出现相当多的新的乙肝感染。而经济和社会发展不如我们的国家，乙肝继续蔓延。

对已经感染乙肝的病人，疫苗不能治病。目前已有的乙肝治疗方法，其效果都比较有限。而丁型肝炎完全没有特异的治疗药物。乙肝和丁肝研究领域多年来翘首以盼获得病毒受体，以便研发新的抗肝炎病毒药物，包括设计和筛选针对受体的药物。



乙肝病毒的研究模型

       研究乙型肝炎的最大困难之一是缺乏好用的体内感染的动物模型和体外用的培养细胞模型。这两大问题分别由中国科学家和法国科学家在1981至1984年和2002年取得突破。不过，法国的工作很多人马上知道，而中国的工作知道的时间较晚、知道的人较少。

       人类乙肝病毒能感染的动物很少：人和猩猩。它不感染老鼠或鸡等常用的一般实验动物，即使猴也不能感染人的乙肝病毒。土拨鼠、地松鼠、树松鼠、苍鹭和鸭等可以感染其本身的肝炎病毒而患病，但不能感染人的乙肝病毒。土拨鼠、地松鼠、树松鼠的肝炎病毒与人乙肝病毒有70%的相似性，而鸭和苍鹭与人乙肝病毒的相似性低很多。因为这些动物都不能感染人的乙肝病毒，所以其肝细胞的病毒受体可能与人肝细胞上结合人乙肝病毒的受体有所不同，不能作为研究人类乙肝病毒的良好模型。缺乏好的动物模型给研究人类乙型肝炎和寻找人类肝细胞上的乙肝病毒受体造成了一大难关。

       1981年，北京第二传染病院资料汇编中，余昌晏等报道树鼩(tree shrew，Tupaia)可以被人的HBV感染，但在六周以后就出现动物死亡而未持续观察。1981年，《医学研究杂志》刊登中国医学科学院庞其方、万新邦、胥爱源、王祖铭、王桂香、朱宝友、张新生的文章“乙型肝炎病毒（HBV）感染树鼩的实验研究”。 医科院与北京第二传染病院两批人当年用树鼩试过多种病毒感染，比如他们曾合作于1981年9月在《中国医学科学院》发表文章“甲型肝炎病毒感染树鼩的初步研究”，发现树鼩可以感染人的甲型肝炎。甲肝论文的作者是医科院的詹美云、刘崇柏、李成明、张文英、朱纯、庞其方、赵同兴、王长安、王金利，和北京第二传染病院的余昌晏、李寿复、佟智功、林尊慧、牛京勤。

1982年开始，广西的严瑞琪和苏建家及他们的合作者改进实验方法和条件，特别是动物饲养条件改善导致树鼩存活延长。1984年，《广西医学院学报》发表肿瘤研究室严瑞琪、苏建家、陈志英、刘由庚、甘友全、周德南的文章报道人血来源的HBV感染十只树鼩后，用血清免疫检测和肝脏组织切片，确定七只被感染、仅一只肯定没感染。1986年，《上海实验动物科学》杂志发表广西肿瘤防治研究所苏建家、严瑞琪、甘友全、周德南、黄定瑞、黄国华的论文，他们用了62只树鼩，其中53只接种人HBV，通过血清免疫学、肝组织切片确定总感染率为84%。他们还用了当时先进的分子杂交、电子显微镜等检测手段，其中电镜显示Dane颗粒，证明人HBV可以感染树鼩。

1996年，瑞士苏黎世大学内科的Walter与德国Freiburg大学内科的Blum等开始用树鼩研究乙肝（Walter et al., 1996）。事实上在1996年以前，中国科学家已经多次重复和进一步研究人乙肝病毒感染树鼩，这其中既有广西的苏建家、严瑞琪课题组（苏建家等，1987；严瑞琪等，1989；黄定瑞等，1990；苏建家等，1992；苏建家等，1995；严瑞琪等，1996），也有其他中国科学家（刘芳华和饶娴宜，1987；李奇芬等，1995；王凤水等，1996）。1996年后还有很多工作（李瑗等，2011）。也就是说，1980到1990年代，中国科学家一系列工作找到了人和猩猩之外唯一能感染人乙肝病毒的、经济、易用的动物模型--树鼩。Walter的文章仅引用苏建家等（1987）和严瑞琪等（1989）论文，而不知道1996年以前的多篇中国论文，更不了解1981年到1986年的几篇中国摘要和论文。

Walter等重复了中国科学家的研究，证实人乙肝病毒注射到树鼩可以导致急性乙型肝炎，表明树鼩可以作为人类乙肝病毒研究的体内模型。他们还发现，将树鼩肝脏的细胞分离后在体外培养（所谓“原代培养”），也可以感染人类乙肝病毒，从而证明树鼩可以作为人类乙肝病毒研究的体外细胞模型。不过，用原代培养的细胞需要经常从动物肝脏分离细胞，不方便。更稳定好用的是可以在体外传代培养的细胞系。

2002年，法国国家医学研究所的Gripon等从人的肝脏分离细胞，并在化合物处理后纯化、筛选，最终获得一株细胞系HepaRG，用多种检测证明它可以感染人的乙肝病毒，从而提供了一个实用的体外培养细胞模型，不过具体用的时候较麻烦：需要用两步培养、诱导，花几周时间后才能进入可感染状态。



乙型肝炎病毒的受体

病毒感染细胞一般首先要病毒结合于细胞膜表面的受体，然后进入细胞内。不同的病毒需要各自的受体，有相应受体的细胞才能有效地被病毒感染。

在人群中，有些人天生命好（具体是遗传和变异带来的好处），其受体分子不能与某些病毒结合，所以天生不会患某种传染病。

在科研中，有些病毒的受体很快被科学家找到，如SARS病毒的受体。但是，有些病毒的受体很难被发现。

       乙肝病毒本身用什么蛋白质与细胞表面的受体结合？已知在结合特异受体之前，该病毒可以与细胞表面的硫酸肝素样分子相互作用而滞留于细胞表面（Schulze et al., 2007；Leistner et al., 2007）。1986年，纽约血液中心的Neurath等确定病毒的Pre-S1结构域有一小段（氨基酸21到47）可能对于结合细胞受体很重要（Neurath et al., 1986）。但其他实验室的一系列工作表明重要的结合位点在氨基酸9至15左右（Schulze et al., 2010）。

       2003年，德国科学家证明对感染人类肝细胞重要的Pre-S1和Pre-S2结构域，也对感染原代培养的树鼩肝细胞重要（Glebe et al., 2003），从而表明人和树鼩的肝细胞含有的乙肝受体可能都结合乙肝病毒的同样蛋白质。这篇文章引用中国的树鼩感染HBV的文章是严瑞琪等（1996）。

       肝细胞表面是什么受体能结合乙肝病毒，从而导致病毒感染？

自从1960年代发现乙肝病毒后迄今近五十年，还没有找到受体，不是因为没人找，而是很难找。

北京生命科学研究所的研究员李文辉，是兰州大学本科生、北京协和医学院的博士、美国哈佛医学院的博士后。他在美国期间发现了SARS病毒的受体（Li et al., 2003）。回国加盟北生所后，他集中精力试图攻克乙肝病毒受体，几年来很少发表论文，坚持带领实验室的研究生、博士后和其他人员不懈努力，终于找到乙肝病毒和丁肝病毒共用的受体，于2012年11月13日在电子刊物eLife发表文章“钠离子-牛磺胆酸共转运多肽是乙型肝炎和丁型肝炎病毒的功能性受体”。文章的并列第一作者是北京大学生命科学学院与北生所联合培养的博士研究生严欢和北生所的博士后钟国才，其他还有徐广伟、何文辉、景致毅、郜振超、黄屹、祁永和、彭博、王海敏、付立冉、宋梅、陈盼、高文青、任碧杰、孙银燕、蔡涛、冯晓锋、隋建华。

李文辉实验室的突破是在前人工作基础上迈进的一大步。他们用几个研究组均报道的乙肝病毒结合受体的肽段（Pre-S1的2至48氨基酸）（Barrera et al., 2005；Engelke et al., 2006；Glebe et al., 2005；Gripon et al., 2005），并将其修饰后作为探针，用中国科学家1980年代发现的树鼩为肝细胞来源得到原代培养的树鼩肝细胞（PTH）为材料，应用强有力的现代生物化学技术，寻找结合Pre-S1肽段的蛋白质，发现了钠离子-牛磺胆酸共转运多肽（NTCP）。用肽段竞争的方法，验证了NTCP结合Pre-S1的特异性。然后用分子生物学的RNA干扰技术，抑制PTH内源产生的NTCP，可以减少人乙肝和丁肝病毒的感染，从而证明NTCP对乙肝病毒和丁肝病毒感染是必需的。他们也发现如果使能感染HBV的HepaRG细胞中NTCP减少，就能降低这些细胞感染HBV。他们还发现，之所以HepaRG细胞需要用药物诱导两周后才能感染HBV的原因是诱导后细胞产生的NTCP增多。他们还用人的原代培养肝细胞，证明人的NTCP对乙肝病毒感染是必需的。

为了知道NTCP是否对乙肝病毒感染是充分的，李文辉实验室用平常不能感染乙肝和丁肝病毒的Huh7和HepG2体外培养细胞系。他们通过转基因导入这些细胞后产生NTCP蛋白质，这些细胞就能被HBV或HDV所感染。此外，他们还确定了NTCP蛋白质结合病毒的关键氨基酸是157到165位。

李文辉实验室取得突破的关键是用了质谱分析加双重亲和纯化。王晓东近年在北生所建立了几个质量非常好的平台，包括基因组和质谱平台。李文辉的第一项基本工作是在北生所高通量测序中心蔡涛的帮助下建立树鼩肝细胞的基因表达图谱，其后再用质谱分析树鼩肝细胞的蛋白质组。这是繁琐的、但基础性的工作，且需要高质量。他们的实验设计巧妙地标记了作为探针的Pre-S1肽段，将其受体结合位点的氨基酸改成可用光偶联的非天然氨基酸，这样光偶联的距离就为零。李文辉实验室还将肽段连接了单克隆抗体识别的位点和生物素标记。在光偶联以后，用单克隆抗体和结合生物素的分子通过亲和层析，可以抵抗强烈的洗脱以去除非特异结合的分子、留下特异结合的分子。这一方法值得学习。

NTCP平时在肝脏起着基本作用：转运胆酸和钠离子。乙型肝炎和丁型肝炎病毒利用了这一正常蛋白质，与它结合而感染肝细胞。猴子的NTCP与人的NTCP很像，但在关键的157到165段不足够像，所以人乙肝病毒只能感染人的肝细胞、不能感染猴子的肝细胞。如果将这段人的序列放到猴NTCP序列中，改造后的猴NTCP也能介导人乙肝病毒感染。

李文辉等用NTCP可以使常用的细胞（如HepG2）可以感染乙肝病毒，为乙肝研究领域提供了便宜且易用的细胞模型。以前发现的HepaRG细胞，购买和培养花费昂贵，而且需要两周诱导后才能感染。

李文辉实验室的研究不但揭示了乙肝和丁肝病毒进入肝细胞的分子机理，而且在通往有效治疗乙肝的道路上迈出了重要一步。李文辉的工作没有结束：以NTCP发现为基础，寻找新的抑制HBV感染细胞的药物，给病人带来福音。

李文辉文章发表的同一天，德国科学家致信祝贺李文辉在中国的工作“会改变HBV领域今后如何做研究、有助于开发很多病人需要的药物”。

第二天，法国科学家也致信李文辉，祝贺他带来HBV领域的重大突破。



可以推广的模式：北京生命科学研究所

1980年代，我国多方面条件比较差，科研人员的工作主要靠自身的坚持，少数能做出优秀成果。

2010年代，我国已经具备基础和条件，而且已经有成功的范例，就不仅要依赖少数单位、少数科学家做出优秀成果，而希望大批科学工作者做出条件能支持的优秀工作，这就需要改革科学体制机制。

众所周知，增长的科研经费如果用原封不动的旧方法管理和投入，其效果有限。而对于如何改革，不同行业、学科和时期有所不同。如何管理和使用我国日益增长的科研经费，使之发挥最佳效果？这不仅是科技人员关心，而且是国家非常关心、对人民有实际意义的重大问题。

       对世界，中国科学家最终要能产出对人类有益的知识，不再是单向消费或少产出知识；对中国，科学界既需要坚持科学探索带动我国的智识风尚，也需要有些（而不是全体）科学家做出有较快应用价值的成果。

       2004年，中组部、科技部、北京市为了改革科技体制作为试点成立的北生所，国家交给的任务是基础研究。成立8年来，北生所已获国际瞩目，2012年初美国HHMI（休斯医学研究所）评国际青年科学家（给予研究经费资助），中国获得7位，4位在北京生命科学研究所。

北生所已有多项基础研究得到国际科学界瞩目。而李文辉团队的乙肝病毒研究的意义超出研究所平时的基础生物学研究范围，更容易为社会理解。

北生所做出多项重要发现需要国家坚定支持，研究所发生危机幸亏国家鼎力相助。

国家选拔王晓东为所长后充分信任他。王晓东对北生所的科学家高标准、严要求的同时充分支持。王晓东本人以基础科学研究闻名于世，但他一直注重可能的应用。他在北生所建立了梯队和平台，为基础和应用研究提供帮助；他坚持的政策使包括李文辉在内的北生所科学家可以追求自己最高科学目标；王晓东在李文辉几乎无产出的时候加建其研究需要的树鼩饲养设施，反映王晓东不仅慧眼识英才而且敢于承担责任；王晓东推动建立的技术平台，也为李文辉等实验室提供了优质的基础；北生所的行政和后勤，为研究人员提供保障和服务。这些为北生所取得多项重要研究成果奠定了基石。

北生所的经验可以推广--政策、人员、模式，并无需增加国家科研拨款，而对已经计划的增加经费要求必须配套体制和机制改革。全国有很多地方，特别是北京以外的城市，也有适用北生所模式的机构和人员。也有不同机构和学科合适的其他模式需要得到合理实施。

北生所是我国在科研管理探索成功的一个模式，应该推广为我国科研管理多样化模式中一个新的、重要的基本模式。



进一步阅读

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本文引用地址：http://blog.sciencenet.cn/blog-2237-633211.html

长江

ラミブジン

抗ウイルス薬
核酸系逆転写酵素阻害薬
適用：B型肝炎 ：

http://meddic.jp/%E3%83%A9%E3%83%9F%E3%83%96%E3%82%B8%E3%83%B3

meddic.jp 薬理学 検索 ：

http://meddic.jp/%E8%96%AC%E7%90%86%E5%AD%A6

王兴

《科学—转化医学》：为何患乙肝的男性比女性更易得肝癌 雄激素受体 DNA片断：

http://www.kaseisyoji.com/viewth ... a=page%3D1#pid69487

王兴

Nature：科学家首次解析丙肝感染蛋白结构

作者：黄辛 李旭芬来源：中国科学报

2013-6-13 17:14:16

关键词： 丙肝 蛋白结构

近日，美国哈佛大学医学院、中科院上海生化与细胞所研究员周界文团队的一项研究，首次解析出丙型肝炎病毒（HCV）感染宿主过程中的一个重要蛋白——p7的精细空间结构，以及与其相互作用的一类抑制剂的分子机理，为丙肝药物的研制带来曙光。相关论文在《自然》杂志在线发表。

HCV与艾滋病病毒、流感病毒一样，属于强危害性的RNA病毒。丙肝病毒所引起的病毒性肝炎，是慢性肝炎的主要病原之一，严重时会导致肝硬化和肝癌。目前估计全世界有1.7亿人感染HCV，我国的HCV携带者和患者总数均居世界首位。而迄今为止，丙肝的治疗一直缺乏令人满意的方法。

p7是丙肝病毒基因表达的唯一离子通道蛋白，对病毒颗粒的组装、成熟乃至释放至关重要，突变和完全删除p7，可使丙肝病毒不产生感染性。但是，以p7为靶点的丙肝药物研究却进展缓慢，主要原因是测定p7的蛋白结构十分困难。长期以来，科学界一直不知道p7离子通道的三维结构及其与小分子化合物结合的作用机理。

周界文和欧阳波博士（文章第一作者）建立了一种基于核磁共振的方法，最终解析出p7蛋白独特的六聚体结构——宛如一朵特别的雪花。这是目前使用核磁共振技术解析出的最大离子通道结构。 周界文课题组还与上海巴斯德所/上海生化与细胞所孙兵课题组合作，研究了p7离子通道中重要氨基酸的作用，并首次鉴定了金刚烷胺类化合物对p7离子通道活性发挥抑制作用的结合位点，并通过一系列功能测试，揭示了p7通道离子转运和药物抑制的机理。

通过对这些病毒离子通道结构和机制方面的理解，科学家期望在不久的将来可以研制出新一代抗HCV的治疗手段。

http://www.nature.com/nature/jou ... ll/nature12283.html

顾汉现

中国乙肝病毒携带者数量降至7% 属中度流行区

作者：仲玉维 来源：新京报

发布时间：2011-10-8 10:15:06

中国乙肝病毒携带者数量降至7% 属中度流行区

昨日（11-10月7日），在第十四届国际病毒性肝炎和肝病大会新闻发布会上，中国工程院院士、北大医学部教授庄辉介绍，目前，中国乙肝病毒携带者数量已由9.75%降至7.18%，属于中度流行区，预计2020年，该数字将降到3%。

据悉，中国上海将于明年6月，举办第十四届国际病毒性肝炎和肝病大会，这是该会议历史上、40年来首次在发展中国家举办。

据介绍，在中国，肝炎已列入传染病报告发病率的前5位，在肝炎中，除了甲肝外，乙型肝炎、肝癌、肝病更是中国人关注的重点。

目前，不少对“乙肝”敏感的行业和领域，比如学前教育、烹饪工艺专业，不再检查“乙肝表面抗原”，防止对“乙肝病毒携带者”造成歧视，“乙肝病毒携带者”的就业等问题，备受人们关注。

工程院院士、复旦大学上海医院闻玉梅教授说：“‘乙肝病毒携带者’也有可能转变成‘乙肝病人’，‘检查不检查’和‘歧视不歧视’是两回事。”闻玉梅院士认为，现在医院不再检查“乙肝表面抗原”，有点像“鸵鸟政策”，如果不检查也可能到最后查出患有肝癌。

她说，主要是要改变人们的错误认识，不是说吃饭、共同生活就会被“乙肝病毒携带者”传染了，但如果要防止孩子、家人患病，还是建议要定期检查、进行治疗。

邓文龙

乙型肝炎病毒夫妻间传播及预防研究


[ 10-09-19 11:32:00 ]    作者：陈立冬 鞠金昌


        乙型肝炎严重危害人类健康，我国属乙型肝炎高地方性流行区，据1992年全国病毒性肝炎血清流行病学调查结果，慢性乙型肝炎病毒感染者约1.2亿，其中慢性乙型肝炎患者约3000万例，每年死于肝硬化和肝癌等乙型肝炎相关疾病人数达30余万人[1]。乙型肝炎已成为严重危害我国人民健康的公共卫生问题。据2002年全国乙型肝炎血清流行病学调查表明， 5岁以下儿童的乙型肝炎表面抗原携带率已由原来的9.7%降至3.2%。但按卫生部提出的到2010年5岁以下儿童的乙型肝炎表面抗原携带率降至1%以下、总人群乙型肝炎表面抗原携带率降至7%以下的目标，仍有一定的差距[2]。夫妻间传播也是乙型肝炎病毒传播的重要途径之一。但由于目前缺乏大规模的流行病学资料，HBV在夫妻间的传播长期被忽视。选择1998年1月至2007年12月门诊新婚体检中发现的HBV感染者的血清乙型肝炎病毒标志物一方为阳性、另一方为阴性的配偶注射乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白（HBIG）预防HBV传播，取得了非常满意的预防效果，现报告如下。  
        肝炎病毒感染者约1.2亿，其中慢性乙型肝炎患者约3000万例，每年死于肝硬化和肝癌等乙型肝炎相关疾病人数达30余万人[1]。乙型肝炎已成为严重危害我国人民健康的公共卫生问题。据2002年全国乙型肝炎血清流行病学调查表明， 5岁以下儿童的乙型肝炎表面抗原携带率已由原来的9.7%降至3.2%。但按卫生部提出的到2010年5岁以下儿童的乙型肝炎表面抗原携带率降至1%以下、总人群乙型肝炎表面抗原携带率降至7%以下的目标，仍有一定的差距[2]。夫妻间传播也是乙型肝炎病毒传播的重要途径之一。但由于目前缺乏大规模的流行病学资料，HBV在夫妻间的传播长期被忽视。选择1998年1月至2007年12月门诊新婚体检中发现的HBV感染者的血清乙型肝炎病毒标志物一方为阳性、另一方为阴性的配偶注射乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白（HBIG）预防HBV传播，取得了非常满意的预防效果，现报告如下。  
        1  资料和方法  
        1.1 临床资料  选择我院门诊1998年1月至2007年12月结婚5年以上的乙型肝炎感染者共742例，检测其配偶血清HBV-M,并询问乙肝疫苗注射情况，予以分类登记统计。  

        1.2 乙肝疫苗和HBIG注射  选择1998年1月至2007年12月门诊新婚体检中发现的HBV感染者的血清乙型肝炎病毒标志物阴性的配偶468例，其中男性256例、女性212例；年龄20~32岁。以上人员均按0、1、6方案注射乙肝疫苗，10ug/次，其中198例在正规注射乙肝疫苗前15天注射HBIG200ug。另选97例HBV阴性配偶作为对照。1年后检测所有被观察者血清HBV-M,分析预防效果。  
        1.3 HBV-M检测  采用ELISA法，试剂盒由英科新创(厦门)科技有限公司提供。其中HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb中同时3项或2项阳性者确定为HBV感染者。  
        1.4 统计学处理  采用x2检验。
       2  结果  
        2.1男女方携带HBV对其配偶（未采取任何预防措施）传染性  男女方传染给配偶的可能性无显著性差异。  
        2.2注射HBIG和乙肝疫苗的预防效果  对270例在新婚体检中发现HBV感染者的HBV-全阴的配偶按0、1、6方案注射了乙肝疫苗，其中198例在注射乙肝疫苗前15天注射了HBIG200IU，发现及时注射HBIG和乙肝疫苗可有效预防HBV在夫妻间传播。  
        3  讨论  
        我国乙型肝炎防治形势仍很严峻，HBV携带率高达8%。除血液、针刺注射等传播形式之外，夫妻间的传播也是一种值得重视的途径[3]，应引起充分的重视。由于目前缺乏大规模的流行病学资料，因此HBV在夫妻间的传播长期以来得不到重视。本研究发现，男、女方携带HBV对其配偶的传染性无明显差异（P>0.05），这和宗敏等的研究结果有差别。经过对本组新婚体检中发现的HBV-M全阴性的配偶立即接种乙肝疫苗或同时注射HBIG可有效的预防HBV在夫妻间的传播。但单纯接种乙肝疫苗组和同时注射HBIG组在预防HBV在夫妻间的传播方面无明显差异（P>0.05）。夫妻间HBV传播可造成HBV携带、急/慢性肝炎、甚至暴发性肝炎，并且HBV感染者的配偶无论是在现症感染、既往感染，还是在总体上均明显高于对照人群。因此，防止HBV在夫妻间的传播是降低乙型肝炎发病率的重要手段之一。针对HBV在夫妻间传播的特点，及时应用乙肝疫苗接种及注射HBIG预防或阻断HBV在夫妻间的传播，对控制乙型肝炎传播有非常重要的社会和经济学意义。特别是对于贫困地区或者欠发达地区的人民，单纯应用乙肝疫苗接种既可起到非常好的预防效果，值得推广应用。   
参 考 文 献   
[1] 戴志澄，齐国明.中国病毒性肝炎:血清流行病学调查.北京:科学技术出版社,1997：39-58.  
[2] 卫生部政策法规司卫生政务通报.第15期,2005,6.16.  
[3] 侯春生,闫秀芹.乙型肝炎病毒家庭内感染的社区调查分析.中华全科医师杂志,2004,3:271-272.

顾汉现

乙肝病毒如何传宗接代？


2009-2-17　　39健康网社区


　　自布鲁贝格发现“澳抗”，以及随着免疫学、分子生物学等方面的进展，科学 家们终于“克隆”了乙肝病毒，至今，人们对乙肝病毒的基因结构‘复制(繁殖)等已基本了解。　　自布鲁贝格发现“澳抗”，以及随着免疫学、分子生物学等方面的进展，科学 家们终于“克隆”了乙肝病毒，至今，人们对乙肝病毒的基因结构‘复制(繁殖)等已基本了解。

　　只有在电子显微镜下，才能识其庐山真面目。它的外形为菜，直径约42纳米，最外一层是”外膜“，厚约7纳米，包绕着整个病病毒，这外膜就是表面抗原(HBSAG),外膜内就是病毒的”核壳体“，这个核壳体表面有一层蛋白质，叫”核壳“，其实就是乙肝核心抗原(HBCAG)核壳厚约2纳米，而乙肝E抗原(HBSAG)则是核壳蛋白的分泌性表现。病毒的核心部分就的DNA，即基因给。还有乙肝病毒复制民需要的酶，即DNA聚敛酶，这些就乙肝病毒的全结构，看来是非常简单，但却可以引起极大祸害。

　　乙肝病毒首先进入人体的血液中，因其具有”嗜肝性“，但径直奔向人全肝脏，依靠自己的外膜粘着在肝细胞上，当外膜裂解后，它使钻进细胞，又钻进肝细胞核内，形成了”共价闭合环状DNA(CCCDNA)，这就是乙肝病毒的“命根子”，从今以后，以CCCDNA为模板，不间断地复制乙肝病毒。CCCDNA十分了得，在肝细胞核内极为稳定，更值得一提的是，目前所有的抗病毒药对CCCDNA奈何不得，只要它存在，乙肝病毒就不能彻底从人体内消失，所以，那些自称能使 乙肝病人“全部转阴”的“专家”直是痴人说梦。

　　另外，乙肝病毒的基因还可以“整合”到病人肝细胞的基因上，就此一点，“全部转阴”也是难上加难。

　　但是，人类对乙肝病毒非束手无策，目前最好的办法是抑制乙肝病毒的复制，选用干扰素、拉米无定等就会达到这个目的。用药后可大大控制乙肝病毒复制，病毒数量锐减，使病人得到康复，这时病人体内剩下的只是“孤独”的CCCDNA，如果人体免疫功能苏醒，说不定也能把它清除出去。

顾汉现

燕赵医院：从病毒性乙肝的发病机理谈治疗


2010-05-31 10:23:52


(转帖)


病毒性乙肝的发病机理很复杂，目前认为其肝细胞损伤不是HBV在肝细胞内复制的结果，而是由T细胞毒反应所介导。石家庄燕赵医院的肝病中心专家谈到人感染HBV后，可引起细胞免疫和体液免疫应答，并激发自身免疫反应及免疫调节功能紊乱。石家庄燕赵医院的肝病专家介绍，这些免疫反应对病毒性乙肝的临床表现及转归有重要意义。

    一.急性肝炎  当免疫功能正常感染HBV后，其细胞毒性T细胞（Tc细胞）攻击受染的肝细胞，由破坏的肝细胞释放入血的HBV，而被特异性抗体所结合，且干扰素生成较多，而致HBV被清除，病情好转终归痊愈。

    二.慢性活动性肝炎  见于免疫功能有缺陷和免疫调节紊乱者。感染HBV后，由于Tc细胞功能不正常，或特异抗体封闭部分肝细胞靶抗原而制约T细胞毒反应，致部分肝细胞损害。干扰素产生较少，HBV持续复制。特异抗体形成不足，肝细胞反复被HBV侵入，形成感染慢性化。此外，肝细胞膜特异脂蛋白（Lsp）因HBV感染而形成自身抗原，刺激B细胞产生抗-Lsp（IgG型），在抑制性T细胞（Ts细胞）活性降低情况下，自身免疫性ADCC效应致肝细胞进行性损害。

    三.慢性迁延性肝炎和无症状HBsAg携带者  当机体免疫功能低下时在感染HBV，不能产生有效的免疫反应，致肝细胞损害轻微或不出现肝细胞损害。尤其无症状HBeAg携带者，缺乏干扰素，不能清除病毒，以致长期携带HBV。

     四.重型肝炎   急性重型肝炎的发生，由于机体免疫反应过强，短期内T细胞毒反应迅速破坏大量感染HBV的肝细胞；或短期内形成大量抗原抗体复合物，激活补体，致局部发生超敏反应（Arthus反应），造成大块肝细胞坏死；肠源性内毒素的吸收，可致Schwartzman反应，使肝细胞发生缺血性坏死；加以α-肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-1和白三烯等细胞因子由单核巨噬细胞释放，促进肝细胞损伤。亚急性重型肝炎发病机制与急性重型肝炎相似，但进展较缓慢。慢性重型肝炎的发病机制较复杂，有待进一步研究。

     通过介绍乙肝的发病机理，患者朋友对于乙肝可以有一个大致的了解。专家提醒，在了解的同时还应该去医院全面彻底的检查，科学诊断疾病。单单通过乙肝症状是无法精确的知道身体内病毒情况的。石家庄燕赵医院是我国915重点肝病防治工程定点单位。对于肝病的治疗有着绝对的技术优势。“中西医结合五联疗法”治疗各种肝炎，中药有清热解毒、利湿退黄、疏肝理气的功效，西医采用核苷类似药物治疗肝病的同时，采用中药进行整体调理，提高抗病毒疗效，有针对性的缓解不良反应，起到相辅相成的作用。中西医结合治疗肝病，毒副作用小、价格低廉、疗效确切，是肝病患者的最佳疗法。  

     燕赵医院肝病专家耿祖玲毕业于河北医科大学，从事传染病临床与科研工作十余年，医德高尚，经验丰富，在学术界享有较高声誉，曾发表学术论文30余篇，多次参加国际及国内全国性的大型学术会议，并多次获奖，尤其擅长运用 “五联疗法”进行乙肝等各种病毒性肝炎的治疗。

    健康咨询电话：0311—85315555

顾汉现

“世界肝炎日”回首抗乙肝用药


日期: 2010-05-19  


       10- 5月19日也就是今天是第三个“世界肝炎日”。第一个真正意义上的“世界肝炎日”为2008年5月19日，这天，世界肝炎联盟（WHA）联手世界卫生组织、其他联合国组织、红十字会、开放性社会研究所（Open  Society  Institute）、盖茨基金会（Gates  Foundation）等机构，在全球正式启动为期5年的“世界肝炎日”运动。



        1999年，由葛兰素史克研发的首只核苷类似物类药物拉米夫定成功上市后，结束了由干扰素α主宰抗乙型肝炎病毒（HBV）治疗的历史。但随着毒副作用和耐药性的肆虐，患者的治疗遭遇了“天花板”。2006年春天，恩替卡韦在我国上市。从目前境况看，它是所有抗病毒药物中抑制病毒速度最快、耐药率最低、安全性最高的药物。这给寥寥无几的乙肝抗病毒药物市场带来了一点新绿。



        随后，新的嘧啶类核苷类似物恩曲他滨、克拉夫定，以及嘌呤类核苷类似物泰诺夫韦已经进入最后冲刺阶段；我国制药企业自主研发的阿德福韦酯也获准上市。



        短短几年内，核苷类药物无论是在新药的研发上，还是临床应用方面均出现了较大的进展。



        随着《EASL欧洲肝病年会最新乙肝指南2009》和《美国消化学会乙肝治疗规范2008A》两大权威指南的出台，乙肝的治疗用药进一步规范化，从而推动了全球抗肝炎药物市场的平稳增长。



        随着社会的进步，近年来，我国政府对乙型肝炎疾病群体有了全面重视。在国家医疗保障体系覆盖率的大幅提高下，推动了乙肝治疗药物市场的全面增长。我国22个重点城市样本医院抗乙肝病毒和肝炎辅助治疗药物在更新换代影响下，进入销售前200强的品种有15只，分别是抗乙肝病毒药物阿德福韦酯、恩替卡韦、拉米夫定、替比夫定。肝炎辅助治疗药物是聚乙二醇化α-2a  干扰素、重组人α-2b干扰素、复方甘草甜素、多烯磷脂酰胆碱、硫普罗宁、谷胱甘肽、门冬氨酸鸟氨酸、苦参素、腺苷蛋氨酸、核糖核酸和肝乐。



        2008年，我国样本医院抗乙肝病毒和肝炎辅助治疗药物的前  15个品种销售总金额已达到了20亿元，同比上一年增长了48.37%。抗乙肝骨干品种阿德福韦酯、恩替卡韦、拉米夫定、替比夫定用药总额同比增长率为  39.44%。2009年，抗乙肝病毒上述4大主力品种用药金额已近8亿元。《慢性乙型肝炎防治指南》中已将阿德福韦酯、恩替卡韦和拉米夫定推荐为全国抗乙肝病毒的一线用药，从而促进了抗乙肝病毒药物市场的快速发展。



        恩替卡韦（Baraclude）是美国百时美施贵宝公司自主研发的鸟嘌呤核苷类似物口服药。2005年，美国FDA批准恩替卡韦上市后，药物良好的作用和厂家的学术推广双管齐下，市场销售额快速增长。2009年超过了抗乙肝病毒市场上一年的领跑者替诺福韦酯而取得桂冠。



        恩替卡韦可选择性抑制乙肝病毒，用于治疗成人伴有病毒复制活跃、血清转氨酶持续增高的慢性乙型肝炎病毒感染。临床研究表明，药物能有效抑制HBV、DNA复制合成，疗效优于临床多年的拉米夫定，而且患者耐药发生率较低。  2009年，全球恩替卡韦用药金额达7.34亿美元，比上一年增长了35.67%。



        近两年，国内恩替卡韦的市场增长形势迅猛异常。2009年，重点城市样本医院抗乙肝病毒用药份额也已从上一年的第2位跃过阿德福韦酯成为新的“领头羊”。



        2005年11月，上海施贵宝公司的恩替卡韦获得了SFDA颁发的生产批文，商品名为“博路定”。2009年3月，SFDA批准海南中和药业生产恩替卡韦原料药。2010年2月，江苏正大天晴药业的原料药和分散片获准上市。据统计，现已进入或完成临床试验，目前等待SFDA批准的国产原料药、片剂、胶囊、分散片和口腔崩解片的厂商近30家。目前，恩替卡韦已成为对不同体质的乙肝病人多种选择的药物，其未来市场发展不容低估。



        随着产品的更新换代，国内外抗乙肝病毒领域临床用药的品种结构逐渐完善。自2005、2006年恩替卡韦（博路定）、替比夫定（素比伏）获准用于治疗慢性乙型肝炎后，目前这两只药物已有5年的临床史，医生和患者正在期盼新药的上市。



        接下来上市的是美国吉利德公司研制的替诺福韦酯，这是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，是抗HIV病毒的药物，商品名为“Viread”。2004～2009  年全球销售额已超过40亿美元。



        近两年，美国吉利德公司又推出了富马酸替诺福韦二吡呋酯片（Tenofovir  disoproxil  fumarate  tablets）。2008  年8月，富马酸替诺福韦二吡呋酯片在基于两项随机、双盲Ⅲ期临床试验数据的基础上，FDA批准其用于治疗成人慢性乙型肝炎感染，也在欧盟、土耳其、澳大利亚、新西兰和加拿大获得临床使用批准。同年，SFDA批准了该药在我国注册，商品名为“韦瑞德”（Viread）。



        富马酸替诺福韦二吡呋酯属于新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，具有水溶性，几乎不经胃肠道吸收，可被迅速吸收并降解成活性物质后，转变为活性代谢产物替诺福韦双磷酸盐。药物疗效明显高于阿德福韦。据悉，2009  年11月，葛兰素史克与美国吉利德公司签署了新药富马酸替诺福韦二吡呋酯在亚洲专利使用权转让协议，将携手进行Viread的市场推广。



        另一只新品种是国产新药美他卡韦，该药是南京长澳医药科技有限公司研制的核苷类似物新药。2009  年9月，美他卡韦肠溶胶囊已顺利通过SFDA临床审批。美他卡韦作为在血浆内迅速代谢为2，3-双脱氧鸟苷（ddG）的前药，继而在细胞内被磷酸化为活性三磷酸盐ddGTP，通过与HBV多聚酶启动的三磷酸脱氧鸟嘌呤核苷竞争结合抑制DNA的复制，导致DNA链合成中止，从而抑制HBV-DNA复制过程。据报道，美他卡韦肠溶胶囊作为一种新型的抗乙肝病毒药物，结构新颖，并且有望克服耐药及停药反弹的缺陷，成为抑制乙肝病毒复制合成的新药。



        第三个“世界肝炎日”回首抗乙肝用药的经历，其实新品种的进入必然会对老品种构成威胁，从而形成新的市场竞争格局。多年来，抗乙肝用药品种较为匮乏，临床需求量远未得到满足。因此，新老药物在不同消费人群中，实行差异化治疗，可以更多地满足市场需求，使慢性乙肝病毒感染者达到最大化的治疗目的。   

顾汉现

急性乙型肝炎60例的临床分析


[ 10-02-03 10:56:00 ]    作者：张晓芳   


【摘要】  目的：对我院近1年多收治的急性乙型肝炎患者进行回顾性分析，探讨急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）清除及临床转归的机制。方法：动态观察60例住院急性乙型肝炎患者肝功能、HBV-DNA、HBV血清标志物的变化。结果：急性乙型肝炎在早期患者HBV广泛抑制，8例患者HBV得以清除，随着肝功能的恢复所有患者HBV DNA在较短时间内转阴，HBeAg与HBV DNA几乎同时阴转，肝功能恢复正常时有44例患者发生HBeAg的血清学转换，27例患者HBsAg转阴，6例发生HBsAg血清学转换。结论：在早期的急性乙型肝炎，绝大多数患者HBV DNA的清除通过非细胞毒性机制来发挥重要作用，而特异性细胞免疫对完全清除HBV DNA,防止感染的慢性化则起着更为重要的作用。

【关键词】  急性乙型肝炎；乙型肝炎病毒；非细胞毒性机制；特异性细胞免疫

在临床上，急性乙型肝炎与慢性乙型肝炎的临床表现、治疗及预后截然不同。目前急性乙型肝炎的诊断主要依靠高滴度的血清抗-HBc-IgM和动态观察血清HBsAg滴度的逐步下降，HBV DNA的早期阴转。本研究动态观察急性乙型肝炎患者肝功能、HBV DNA、HBV血清标志物的变化，探讨急性乙肝HBV清除及临床转归机制。

    1   资料和方法

    1.1   一般资料   收集我院2007年1月~2008年6月住院的60例急性乙肝患者，诊断符合2000年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》标准。病原学诊断标准为HBV-M和HBV DNA定量发生动态变化，HBeAg转阴或发生血清学转换，HBsAg转阴或发生血清学转换，其他肝炎（甲、丙、丁、戊、庚）病原学指标均为阴性。60例中男46例，女14例，年龄（36.0±13.2）岁，平均发病时间（9.8±3.4） d，ALT（1320.9±576.3） U/L，总胆红素（124.1±78.6） μmol/L，平均住院天数为（41.6±6.8） d。

    1.2   方法   HBV DNA定量采用实时荧光PCR方法检测，结果以<1×103 copies/ml为阴性；HBV-M的检测采用美国雅培公司全自动酶标仪，雅培3代试剂；肝功能的检测采用常规生化法。

    1.3   统计学方法   采用SPSS12统计软件，以均数标准差x±s表示，计数资料采用χ2检验，P<0.05示差异有统计学意义。

    2   结      果

    2.1   HBV DNA定量的变化   有8例患者入院时HBV DNA已阴转，其余患者均呈较低水平复制，其中22例为103 copies/ml、16例为104 copies/ml、其余 14例患者HBV DNA均为105 copies/ml。所有患者随着肝功能的恢复在较短时间内转阴，最短时间不到1周，最长约33 d，平均转阴时间约18 d。

    2.2   HBV-M及ALT的变化   入院时有8例患者HBsAg阴性，其中6例为抗-HBs、抗-HBc阳性，2例为抗-HBe、抗-HBc阳性，HBV-DNA均为阴性，但ALT均较高（>500 U/L）。其余52例患者HBsAg均为阳性，其中1例抗- HBs同时阳性；45例患者HBeAg阳性；17例患者抗-HBe阳性，其中10例与HBeAg同时阳性，所有患者抗-HBc及抗-HBc IgM阳性。HBV 标志物与HBV DNA的关系见表1。

    住院期间随着病情好转，患者HBeAg值也迅速下降，与HBV-DNA几乎同时转阴，肝功能正常时有44例发生血清学转换；于此同时患者的HBsAg值也逐步下降，肝功能正常时有27例转阴，6例发生血清学转换；在整个住院期间抗-HBc及抗-HBc IgM变化不明显。而肝功能的恢复较乙肝病毒的清除晚，14d内仅2例患者ALT恢复正常，48天内几乎所有患者ALT复常。

    3   讨      论

    乙型肝炎病毒(HBV)感染机体后出现不同的临床转归的机制目前尚不完全清楚，可能取决于病毒和宿主2个方面的因素。绝大多数急性乙型肝炎呈自限性过程，且预后良好，但仍有5%~10%发展为慢性乙型肝炎。对于可能会演变为慢性乙型肝炎的急性乙型肝炎患者进行及时的抗病毒及免疫调节治疗可进一步减少其慢性化率[1]。

    本研究发现，60例急性乙型肝炎患者从出现症状到医院就诊时ALT水平均较高，而多数患者血清HBV DNA载量极低，仅为103~104 copies/ml，另有8例HBV DNA已为阴性，提示在肝脏的转氨酶升高之前，HBV的复制就受到广泛的抑制和清除，与有关的研究结果一致[2]，这说明在急性乙型肝炎早期HBV的清除中非细胞毒性机制的确起着重要作用，这也提示HBV DNA的早期阴转有助于急性乙型肝炎的诊断。

    近年来，Guidotti等[3]发现HBV急性感染黑猩猩后，肝脏淋巴细胞浸润高峰前就出现肝组织HBV DNA及血清中Dan颗粒的清除，而肝脏损伤不明显，其主要是耗竭HBV复制过程中的RNA中间产物及清除肝细胞中共价闭合环状DNA(cccDNA)来实现的，非特异性NK、NKT细胞产生INF-γ、TNFα介导这一过程。

    我们还发现，在急性乙型肝炎的早期就出现HBeAg阴转或HBeAg/HBeAb转换，肝功能正常时， 44例患者HBeAg发生血清学转换，而慢性乙型肝炎急性发作患者则很少发生e系统的转换，这也有助于急性乙型肝炎的诊断。同时结合HBV-DNA的动态变化，提示急性乙型肝炎的预后与病毒复制密切相关。近年来免疫学研究发现[4]，几乎所有的急性乙型肝炎患者均可产生针对HBcAg及HBeAg抗原决定族的有效CD4+免疫应答与血清HBV-DNA及HBsAg的清除密切相关。HBV特异性的CD4+应答可能通过启动及增强CTL及抗HBV细胞因子的产生而发挥其抗病毒作用。

【参考文献】
  [1] Kundu SS, Kundu AK, Pal NK. Interferon-alpha in the treatment of acute prolonged hepatitis B virus infection. J Assoc Phsicians India, 2000;48(2-3):671-680.

[2] Webster GJM,Reigant S，Maini MK，et al. Incubation phase of acute hepatitis B in man：dynamic of cellular immune mechanisms。Hepatology，2000，32(5)：1117-1124.

[3] Guidotti LG，Rochford R，Chung J，et al.Viral clearance without destruction of infected cells during acute HBV infection. Science，1999，284(5415)：825-829.

[4] Guidotti LG. The role of cytotoxic T cells and cytokines in the cnotrol of hepatitis B virus infection.Vaccine,2002,20(suppl 4):80-82.

顾汉现

乙肝病毒血清标志物与ALT相关性分析
来源：中国论文下载中心    [ 10-02-03 09:44:00 ]    作者：段爱军    编辑：studa20

【摘要】  目的：观察乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性者乙肝病毒核心抗体IgM(HBc-IgM)及其他血清病毒标志物(HBsAb、 HBcAb、 HBeAg、 HBeAb)不同阳性结果时血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的变化，分析其相关性。方法：检测1056例HBsAg阳性者血清病毒标志物和ALT，依据乙肝病毒标志物阳性情况的不同分为A、B、C、D共4组。计算各组ALT>40 U/L的例数及其百分率。结果：ALT异常增高的例数及其百分率分别为A组174例（76.7%)，B组105例(55.3%)，C组22例（21.4%），D组123例(23.2%)，A、B组分别与C、D组间ALT异常增高率差异有统计学意义(P<0.05)。结论：在临床上同时检测抗HBc-IgM及各项血清学病毒标志物对了解乙型肝炎患者的病情和指导治疗具有较大的价值。

【关键词】  乙型肝炎病毒；表面抗原；核心抗体IgM；丙氨酸氨基转移酶

    [Abstract]   Objective: To observe the change of alanine aminotransferase (ALT) in hepatitis B surface antigen (HBsAg) positive patients’ serum with different positive groups of hepatitis B core antibody IgM (HBc-IgM) and other hepatitis B serological markers (HBsAb, HBcAb, HBeAg, HBeAb). Methods:  Serum markers of virus and ALT from 1056 HBsAg positive patients were detected by using enzyme-linked immunosorbent assay(ELSIA) and enzyme rate method. The 1056 cases were divided into 4 groups according to the positive situation of HBV serum markers , and then in each group the number and the percentage of ALT>40 U/L were counted. Results: The number and the percentage were as follows: 174 cases(76.7%) in group A, 105 cases(55.3%) in group B, 22 cases(21.4%) in group C and 123 cases (23.2%) in group D. There was significant difference of ALT abnormal increase rate between A, B groups and C, D groups separately (P<0.05), but there is no significant difference between group C and D（P>0.05）. Conclusions: The ALT increase rate of HBc-IgM positive serum from HBsAg positive patients is more significant than that of HBc-IgM negative serum.

    [Key words]   Hepatitis B virus；Hepatitis B surface antigen；Hepatitis B core antibody-IgM； Alanine aminotransferase

    全世界约有4亿乙型肝炎病毒（HBV）感染者, 其中约2%~5%为慢性感染[1]，我国HBV携带者超过1亿。目前临床上用于乙型肝炎诊断的血清免疫学检测项目主要包括乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、核心抗体（HBcAb）、 e抗原（HBeAg）、e抗体（HBeAb）(即通常俗称的“二对半”)及乙肝病毒核心抗体IgM（HBc-IgM）、乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）等，其中HBc-IgM是诊断急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎活动期的重要血清学标志；“二对半”各项指标与HBV复制及疾病不同阶段有关；而丙氨酸氨基转移酶（ALT）在肝炎急性期升高明显，是判断肝脏损害程度的主要指标。我们对2000年2月~2008年6月我院收治的HBsAg阳性患者依据其HBc-IgM和“二对半”指标阳性不同情况进行分组，并对其ALT结果进行分析比较，以探讨HBc-IgM、乙肝病毒表面标志物与肝功能损伤的关系。

    1   资料和方法

    1.1   一般资料   HBsAg阳性者1056例中男615例，女441例，年龄5~85岁，平均52岁。依据乙肝病毒标志物及HBc-IgM阳性情况分为4组：A组227例，为HBc-IgM、HBeAg、HBcAb阳性；B组190例，为HBc-IgM、HBeAb、HBcAb阳性；C组103例，为HBc-IgM阴性、HBeAg、HBcAb阳性；D组530例，为HBc-IgM阴性、 HBeAb、HBcAb阳性。

    1.2   方法

    1.2.1   HBV抗原、抗体检测   采用ELISA法，利用G5031型酶标仪检测。结果以阴性或阳性报告，HBc-IgM阳性结果均为2次检测结果。乙肝病毒标志物诊断试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司提供。

    1.2.2   ALT检测   采用酶速率法，利用全自动生化仪(Selectra-E，荷兰威图)检测，以ALT>40 U/L为异常升高，结果以U/L为单位报告，不同组的ALT则用异常增高率表示。转氨酶检测试剂由中生北控公司提供。

    1.3   统计学方法   应用SPSS11.5统计软件包进行统计处理，两个样本比较采用χ2检验。

    2   结      果

    A组227例ALT>40 U/L有174例（76.7%），B组190例中105例（55.3%），C组103例中22例（21.4%），D组530例中有123例（23.2%），各组血清ALT异常增高者ATL值的分布比较见图1，其中A组、B组分别与C、D组比较，ALT异常增高率差异有统计学意义（P<0.05)，A、B组间比较差异亦有统计学意义（P<0.05）,而C、D组间差异无统计学意义（P>0.05）。各组ALT增高值分布情况：各组中多数患者ALT值分布在40～200 U/L之间，占66%~78%， 200~500 U/L的患者占11%~17%，500~1000 U/L的患者占4%~13%，>1000 U/L者少，仅占4%~6%。

    3   讨      论

    临床上检测HBV DNA是提示病毒复制的金标准[2,3]。但检测HBV DNA的实验设备及实验要求较高，一般农村实验室无法检测。而ALT在肝炎急性期明显升高，提示肝脏的受损程度，通常与抗HBc-IgM和HBV“二对半”一起检测，这已经成为农村小型医院临床诊治乙肝患者的重要参考依据。

    本研究中根据乙肝病毒标志物及HBc-IgM阳性情况对观察对象进行分组，发现各组ALT的分布范围差异无统计学意义，主要分布于40~200 U/L。但HBc-IgM阳性患者(A组和B组)的ALT异常升高率明显高于HBc-IgM阴性患者(C组和D组)。而HBc-IgM阴性患者中，尽管其他血清病毒标志物阳性结果不同，但二组间(C组和D组)ALT异常升高率却无明显统计学差异。由此说明HBc-IgM对乙型肝炎急性期和复发判断有一定的参考价值。HBcAg作为存在于肝细胞核内的一种靶抗原，当肝细胞被破坏时才得以释放，刺激机体产生抗HBc-IgM，肝炎急性期时肝细胞往往会有不同程度的破坏，HBc-IgM作为机体感染HBV后在血液中最早出现的特异抗体[4]，在肝炎的急性期呈现高滴度，在慢性活动性乙型肝炎患者检出率及滴度亦较高。但是，随着病情的控制与好转，HBc-IgM滴度降低乃至消失，部分HBc-IgM 8个月后可逐渐转阴。然而HBsAg和其他HBV血清标志物在血清中可持续较长时间。由此可见同时检测抗HBc-IgM和HBsAg对肝细胞损害情况的判断有较大价值。此外在本研究中还发现HBc-IgM阳性患者中，HBeAg阳性的A 组患者ALT异常增高率也相对高于B 组(HBeAb阳性)。HBeAg主要由HBcAg被蛋白酶水解而释放，其阳性表明患者体内存在HBV活动性复制，活动性愈大，受感染时肝细胞溶解愈严重，肝实质损害愈显著[5]，与赵荣平等[6]报道结果相似。然而由于条件和病例的限制，本研究未进一步研究HBsAg阴性者体内肝功能受损状况以及研究HBc-IgM、血清病毒标志物与HBV DNA的关系。但已有相关研究表明，HBsAg阴性而HBc-IgM阳性者可能是处于乙型肝炎的窗口期，此时HBsAg在血清中的滴度较低无法检出，血清ALT升高亦不明显，但仍可检出HBV DNA和HBc-IgM，患者体内的HBV仍在复制，提示存在感染和传播的危险性[4]。因此，在临床上同时检测抗HBc-IgM及各项血清学病毒标志物对了解乙型肝炎患者的病情和指导治疗具有较大的价值。

【参考文献】
  [1] Gish RG.Current treatment and future directions in the management of chronic hepatitis B viral infection[J]. Clin Liver Dis, 2005, 9(4)：541-565.

[2] 徐爱东.慢性乙型肝炎84 例血清HBV-DNA水平对重组A-干扰素疗效的影响[J]. 南通大学学报（医学版）.2004, 24(4):466-466.

[3] 黄增相, 陈 张. 乙型肝炎病毒DNA定量与血清病毒标志物的关系[J]. 中华肝脏病杂志, 2004, 12(1)：43.

[4] 李金明. 乙型肝炎病毒血清标志物测定及结果解释的若干问题[J]. 中华检验医学杂志, 2006, 29(5)：385-389.

[5] 沈云松. 乙型肝炎病毒标志物不同模式与血清前白蛋白含量的关系[J]. 国外医学临床生物化学与检验学分册, 2005, 26(6)：381-382.

[6] 赵荣平，茅骏翔，邬叶红，等.乙型肝炎病毒标志物不同阳性类型与血清丙氨酸转氨酶分析[J]. 检验医学, 2006, 21(2)：173-175.