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英男子喝尿6年减肥1百斤 称尿疗能解决粮食危机 尿疗介绍等

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发表于 2017-5-17 08:58:24 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 邓文龙 于 2017-5-17 10:13 编辑

男子喝尿6年减肥100斤 称尿疗能解决粮食危机

2017-05-17 02:21:19

  参考消息网17-5月17日报道台媒称,过去尿疗法让不少人相信能治百病。英国一名54岁男子近来公开声称喝尿让他瘦了50公斤,还治好了气喘。他更表示,靠着喝尿不吃东西,不但能省钱,还能解决粮食短缺问题。
  据台湾“中央社”网站17-5月16日援引英国“地铁报”报道,男子戴夫墨菲过去重达127公斤,他在2012年开始接触到尿疗法后,就开始连续30天不吃饭不喝水,只喝自己的尿液过活,结果一口气瘦到剩下76公斤。
  墨菲是个爆肝的工程师,因为工作关系导致生活不正常,常常外食也让他体重超标,加上原本身体就有气喘疾病,健康情况几乎岌岌可危。
  墨菲接触到尿疗法后,尽管觉得喝尿肮脏又恶心,但为了身体着想,他仍决定放手一搏,回家后每天早上喝一杯自己的尿,“起初我也很害怕,所以把尿液混合葡萄柚汁,放在冰箱中等凉了喝。”
  经过多年的实验,墨菲排便顺畅,瘦了50公斤,血压变正常,还治好了气喘病。他还透露,洗完脸后会用尿液滋润脸部,用尿夜洗手,他认为尿液是最好的抗老产品,是绝佳冻龄秘方。
  此外,他也认为,喝尿可以解决世界粮食短缺问题,只要靠喝尿,不需要吃下很多食物,自然也省下钱。他6年来靠着喝尿填饱肚子,都没有生病,也开始鼓吹身边亲友尝试。
  报道称,尿疗法古已有之,除了中国汉方古典《伤寒论》曾记载以童尿治病,18世纪的法国及德国也有医生利用尿液医治坐骨神经痛、风湿、哮喘及痛风等病。



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 楼主| 发表于 2017-5-17 09:17:44 | 显示全部楼层
本帖最后由 邓文龙 于 2017-5-17 10:04 编辑

尿疗法

维基百科,自由的百科全书

Star of life caution.svg 维基百科中的医疗相关内容仅供参考,详见医学声明。如需专业意见请咨询专业人士。

人尿样品
尿疗法是通过饮用尿液来达到治疗疾病的目的,同时亦有采用尿液清洗皮肤、清洗毛发的做法[1]。明代李时珍所著《本草纲目》中记载“人尿,气味咸、寒、无毒,主治温热头痛,童男者尤良”[2]
由于尿疗法未被现代医学界证实并不为主流科学界所接受,所以对该疗法的评价两极分化。尿疗者表示该疗法确有祛病保健之类的功效,而一些医学专家却表示该疗法毫无科学根据,可以算是一种心理安慰[1]。
目录  
1        《本草纲目》的记载
2        在医学中
3        相关书籍
4        相关报道
5        采用尿疗法的名人
6        评价
6.1        正面评价
6.2        负面评价
7        参见
8        参考资料
《本草纲目》的记载
Wikisource-logo.svg
维基文库中相关的原始文献:
本草纲目/人部#人尿
尿,从尸从水,会意也。方家谓之轮回酒、还元汤,隐语也。气味咸,寒,无毒。主治寒热头痛,温气。童男者尤良(《别录》)。主久嗽上气失声,及症积满腹(苏恭)。明目益声,润肌肤,利大肠,推陈致新,去咳嗽肺痿,鬼气 病。停久者,服之佳。恐冷,则和热汤服(藏器)。止劳渴,润心肺,疗血闷热狂,扑损,瘀血在内运绝,止吐血鼻衄,皮肤皴裂,难产,胎衣不下,蛇犬咬(大明)。滋阴降火甚速(震亨)。杀虫解毒,疗疟中(时珍)。[2]
在医学中
尿液中含有酵素尿激酶(Urokinase)及造血荷尔蒙的红血球生成激素,有溶解血栓的效果。[3]
相关书籍
《奇跡が起きる尿療法》:1990年由日本医师中尾良一出版,中尾良一表示用尿来治病的历史,在印度有5000年,欧洲有4000年,此书在全世界引起尿疗法的话题,尿疗法渐为一般人所熟悉。
《朱丹溪祖传尿疗法:喝自己的尿治自己的病》:在中国,朱熹23代孙朱锦富遵守祖传“回龙汤”秘方饮尿数十年,并撰有此书。
相关报道
中国中央电视台的《走进科学》节目曾报道过“喝尿村”,节目指出西安市灞桥区雾庄北村的很多老人因坚持喝尿而治好了很多顽疾的事,并表示这种疗法虽然目前还没有被主流医学界认可,但也不要急于否定。[4]
采用尿疗法的名人
20世纪90年代,香港著名节目主持人叶特生在癌病康复之后,亦公开表示自己透过尿疗法而康复,并大力推广尿疗法。
香港艺人陈启泰曾被传媒揭发饮尿治脱发。
玻利维亚总统胡安·埃沃·莫拉莱斯·艾玛在2014年7月2日表示,曾经有过饮用自己的尿液用以保养身体的习惯。同时发表言论“对抗咳嗽,没有什么比一碗尿液更有效”。[5]
评价
正面评价
人体尿液是由肾脏过滤后的干净活泉,是人体内的血清、甚至比血液还干净,所以喝了当然无害。不但如此,为了养护自己的细胞、与病魔作战,所用的各种抗体成分亦包含在尿中。实行尿疗法,是把含有抗体的尿液,再度注入体内,使细胞渐渐再生复活、增强自然治愈力及身体免疫系统,因此可以治好各种亦是万种病症。
负面评价
一些医学专家表示尿疗法是无稽之谈。有人说:“尿液是人体的排泄物,属于代谢的废物。如果将这些废物喝下,会被人体再次吸收,脾、肾功能的不好的人,可能会引发一系列问题。而且,现代医学属于循证医学,是遵循证据的医学,喝尿治病则无法实现临床验证,是没有任何科学根据的。”还有人说:“尿液中主要成分是水,身体健康的人喝下自己的尿,一般不会对身体产生太大副作用,但是如果身体有严重疾病,服用药物过后,毒素可能通过尿液排出来,这种尿液就很可能对人体造成危害。虽然目前没有研究结果,但这些本已排出体外的代谢废物重新被吸收,对人体健康肯定没有益处。也有专家认为,那些自称喝尿治好病的,不排除存在心理暗示作用的可能。”[6]
在民间,反对者的数量大大多于支持者。比如在中国大陆某网站以“对于尿疗,你怎么看”为名的调查显示,超过80%的人表示尿疗治病不靠谱,只有6.5%的人认为确实能治病。[6]

参考资料
^ 跳转至: 1.0 1.1 (简体中文)尿疗者谈治疗细节:要趁热喝 还可用于洗脸、洗头,中国日报中文网
^ 跳转至: 2.0 2.1 《本草纲目》
跳转 ^ 尤其是喝早晨第一泡尿液,因为在人体活动的白天中,无法产生这种"SPU"物质,这种物质具有强化对抗体内病原菌等的免疫功能,而此种物质只有于睡眠才能被大量的制造,但有些人体质不同,白天也会有此种物质。因人而异。 不过最重要的是,服用的效果要由自己判定,配合自己的体质来实行适量的尿疗法。 公厕收集尿液制药 医生:提取尿激酶治心血管病,凤凰网。
跳转 ^ 酷6网上的西安有个喝尿村视频。
跳转 ^ (简体中文)玻利维亚总统透露自己通过“尿疗”保养身体,环球网。
^ 跳转至: 6.0 6.1 (简体中文)央视网调查:一场“喝尿疗法”引起的争议,CNTV。

https://zh.wikipedia.org/wiki/%E5%B0%BF%E7%99%82%E6%B3%95

https://zh.wikipedia.org/wiki/%E9%A3%B2%E5%B0%BF



尿疗:

http://www.baike.com/wiki/%E5%B0%BF%E7%96%97%E6%B3%95

中国尿疗法:

http://baike.baidu.com/link?url= ... SDJMLALroE1oXlUQcKK

尿疗法治病的神奇:

http://baike.baidu.com/link?url= ... --zhbEB6#reference-[1]-11612422-wrap

古老而神奇的中国尿疗法(视频):

http://bbs.clzg.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=308753

美国女子治疗癌症用“尿疗法” 每天喝5杯尿:
来源: 齐鲁网  2014-06-23 08:43:41  

http://v.iqilu.com/jcdb/xw/2014/0623/4084818.html



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 楼主| 发表于 2017-5-17 09:28:23 | 显示全部楼层
本帖最后由 邓文龙 于 2017-5-17 09:29 编辑

人尿疗法

时间:2009-04-17 03:48

人尿疗法:抗衰老的最佳途径——王玉章(在全国抗衰老大会上的发言草稿)
七百多年前,当成吉思汗驰骋沙场凯旋归来的时候,顿时感到自己衰老了,他感叹到:“到如今还没有我打不败的敌手,我现在只希望征服死亡。”于是许多人向他进献奇效的药酒和长生不死的药丸,而成吉思汗却命令这些献方的医士们亲自服下他们的神丹,然后给他们砍掉脑袋,看他们能不能活下来。
一代天骄的成吉思汗眼里是揉不进沙子的,他心知肚明,衰老比所有的敌人更可怕,他能征服强大的敌人而无法征服衰老。几百年过去了,我国空间技术的奇迹已经嫦蛾奔月。大家一定很关心通过这次全国抗衰大会的举办,能否找到与衰老作斗争的最佳方法——延长寿命的光能否照亮每一个人的心窝?我的回答是肯定的——能!即人尿疗法是抗衰老的最佳途径。
根据生物学家的推算,人的自然寿命应为110~175岁。美国斯坦福大学的海尔费利克教授研究细胞的寿命已经多年,根据海尔费利克界限推算,人的寿命是120岁,这与现存的百岁老人的年令相一致。但是,现代大多数人只能活到六七十岁、七八十岁。今年5月18日,第60届世界卫生大会在瑞士的日内瓦公布了《2007年世界卫生统计报告》。这是世界卫生组织(WHO)193个成员国最完整的卫生统计报告。在这份报告中,最引人注目的是全球人均寿命排名。其中,欧洲小国圣马力诺男性平均寿命最高,是80岁。日本女性最长寿,平均寿命达86岁。我们中国男性和女性平均寿命分别为71岁和74岁。
近两年,专为人们送快乐的我国曲艺界名人如高秀敏、马季、侯耀文等因心脏病突然谢幕。一个又一个欢乐记忆的远去,让喜欢他们的人在惋惜、心痛的同时,更多了一份对人生健康长寿的思考。我们自己怎样才能健康地活着?怎样的活法才能健康?这是必须要好好想一想的话题。
权威医学家分析,我国慢性疾病患病率越来越高,并且发病年龄更趋向年轻化。以心脏病为例,其发病年龄从前些年的五六十岁发展到现在的三四十岁,广州有位小患者才十六岁就心肌梗死了。“WHO”对死亡人群调查,死于癌症的占15%,心脏病占70%,无疾而终的老人仅为3%。我国卫生部官员确认有80%的死亡老人是在慢性疾病的长期折磨中痛苦地离世的。现在,60岁以上的老年人,大多忍受着两三种以上慢性疾病的煎熬。面对我国严峻的健康形式——“看病难”、“看病贵”,党和政府非常关心、非常重视。国家“发改委”、卫生部等政府职能部门绞尽脑汁、积极行动中。据报载,明年上半年,解决这个健康问题的方案将要与我们见面。这不仅是中老年人,也是各年龄段人所期盼的喜讯。健康这个话题与我们息息相关,报上说,现在城市人有58%病了不去就医住院。农村80%的患者自己硬抗着,因为看不起病,没钱住院。其实,有钱的人也难买到健康:例1,哈市翁某75岁因淋巴癌住哈尔滨医大二院(系三甲医院),仅82天就给治死了。收翁住院费用138.9万元,北京专家收翁会诊费30万元(实际上在医的指导下,翁两个多月共花费550多万元——其子经商有钱)。例2,台湾首富陈先生在北京给弟弟治癌症,用了一百个亿也没能留住弟命。例3,美国前总统克林顿心脏病搭桥四根(听说心梗最多搭四根),因血管再次堵塞危及到生命又做了第二次手术。例4,河北邯郸师范学院李清波老师与美国克氏病情相同(在北京阜外医院搭桥四根),但李老师搭桥后坚持吃洋葱、喝尿(洋葱与尿疗是治疗癌症、中风、心脏病及糖尿病的双保险。)因为洋葱中的营养成分不仅防治癌症,而且降血脂、降血粘、降血压、降血糖效果独特,欧美专家认为洋葱是蔬菜中的“皇后”,还被誉为人体内最好的“清道夫。”洋葱能清除人体内各种垃圾,是氧自由基(又称自由基或游离基)的克星。医学科学家指出,自由基是人类健康的最大杀手,它不仅能让铁生锈,也能使人体“生锈”(人类90%的疾病都是自由基惹的祸)。换句话说,自由基能把人体需要的不饱和脂肪酸氧化成对人体有害的饱和脂肪酸储藏在五脏六腑中“堵塞交通”,自由基不仅能使人内分泌紊乱,而粘附在血管壁上的大量自由基更会使血管硬化并加速血管的老化,还会直接影响血液循环和使新陈代谢受阻。自由基使原本新鲜的血液形成大大小小的斑块导致血栓形成。医学专家指出,动脉粥样硬化是人人都要发生的,硬化程度—病变部位血管壁的环形狭窄达到50%——早期动脉硬化时仍会自我感觉良好——认为自己是无病的健康人。当动脉硬化晚期——病变部位的血管环形狭窄达到70%时,危险随时可能发生(气候突变、不良情绪——如愤怒等诱因造成血管痉挛)。我自己60岁(11年前)那年夏天就突发大面积急性心肌梗塞——经现代医药三天四夜的抢救才死而复活,教训是深刻的。沈阳市第四人民医院肿瘤科高贵主任医师指出,对于60岁以上的老人来说,动脉硬化程度每年递增(老化)约为1%,对老教授的这句经验之谈我深记在心。洋葱不仅能清除五脏六腑内的自由基,使血管软化恢复弹性,广西壮族自治区科学研究所的科研人员在临床实验中,还检测出洋葱内所含的半胱氨酸能延缓细胞衰老,有延年益寿作用。总之,各国专家确认洋葱具有的杀菌、消肿、解毒、祛风、通窍、下气的功效和人尿能抗感染、抗病毒、抗肿瘤及溶解血栓(人尿中的尿激酶又叫溶栓酶,是从人尿中提取的糖蛋白,可使血管内血栓中的纤维蛋白溶酶原,变成血纤维蛋白溶酶,具有溶解血栓的作用,已在临床广泛应用。喝的尿中溶栓酶虽然极微量,但作用巨大,可像热核反应那样在一分钟内,一个酶分子能将上百万个血栓分子分解成肽类物质和氨基酸,从而变害为宝)的作用。所以李清波老师吃洋葱、喝尿避免了再次手术之苦,至今四年了,活得挺开心。李老师的电话是0310-3035319,一问便知。



人尿疗法(2)
时间:2009-04-17 03:48
世界抗衰老医学会主席罗博特·高德曼博士通过对抗衰老医学以及现代人类健康状况的多年研究,得出结论:不良的生活方式,不合理的膳食结构是导致现代人体质不佳的主要原因。所以尽快养成健康科学的生活习惯是改善自己健康状态的最根本方法。国家卫生部原付部长,77岁的老年保健医学研究会会长顾英奇也指出:“躯体健康、心里健康、社会适应能力”这三个方面都处在完美状态才叫健康。中国医科大学第一临床医院侯淑英教授指出,喝尿是新的健康理念和生活方式。是自我养生、延缓衰老的最佳途径。她说,“饮尿疗法作为一种民间疗法具有悠久历史。据考,我国中医临床中应用尿疗法已有三千余年历史。尿疗经过几千年的应用,是经得起科学检验的方法,是健康法。从新的角度认识尿疗法后,人们排除了对尿疗的世俗偏见,在现代重新兴起,并得到进一步的开发和推广,这是一种健康文化,是一种新的健康理念和生活方式。目前尿疗已在56个国家和地区广泛流行。尿疗热——潮涌东西方。据估计,我国实施尿疗法者已达三百万人。”现在这个数字已经超过一千万。侯淑英主任医师还从现代医学科学的角度指出,“尿疗法是古代人类一种原始的保健医疗方法,经现代医学科学论证,它有增强人体内免疫细胞功能,并能将低下或亢进的免疫功能双向调节至正常的作用,而且能激活人体固有的自然治愈力。它对所有的疾病,特别是那些被现代医学视为难治之症、不治之症的疾病都有疗效。”世界十大尿疗专家之一的日本医学博士中尾良一先生也从现代医学角度肯定了尿疗的科学性,他还提出尿疗法的推行是一场“医疗上的革命。”他凭借用人尿治病60多年的经验指出,“古老且新异的治疗方法——尿疗法,小可以治感冒,大能挽救晚期癌症患者的生命,对所有疾病均有疗效。这是美国的一些出版物对尿疗法的描绘:尿是血液代谢后剩余物质,经体内循环后,从血液中分离出来的‘血液复印件’,它犹如储存着体内信息的重要磁盘,由此可见,丢弃这么重要的信息源,该是多么愚蠢!”简而言之,尿疗法即是人类运用自身体内具有的活性物质来增强自身免疫功能的疗法,是一种生物信息反馈疗法,是常规药物与常规医疗手段都无法与它相比的(尿疗法可以脚不出家门——省时、省力,不需要花钱,不需要求医问药,亦无任何毒副作用,百分之百地没有误诊——现在去医院治病,死亡人群中有三分之一是属于误诊和用错了药给造成的。),即可防病治病,又可健身美容和抗衰益寿的一种非药物的自然疗法。总之,人尿疗法为缺钱治病的人指出一条新的路,为有钱买不到健康的人打开了一扇新的门。



人尿疗法(3-7):

http://www.zhongyao.org.cn/yi/lf/ww/200904/165039_3.html



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 楼主| 发表于 2017-5-17 10:03:02 | 显示全部楼层
尿的成分

尿液中含多种无机盐其中:
钙2.5~7.5毫摩/24小时,
磷12.8~22.4毫摩/24小时,
尿酸2.4~4.1毫摩/24小时,
草酸盐91~456微摩/24小时,
镁2.1~8.2毫摩/24小时,
钾51~102毫摩/24小时,
钠130~261毫摩/24小时,
锌2.3~18.4微摩/24小时,
氯170~255毫摩/24小时,
硫酸盐77.5毫摩/24小时。
尿液中还含有多机成分,其中:
胱氯酸83~830微摩/24小时,
氨20~70毫摩/24小时,
环磷酸腺苷(camp)1.0~11.5微摩/24小时,
肌酐男为7~18毫摩/24小时,
女为5.3~16.0毫摩/24小时,
可滴定酸20~40毫摩/24小时,
尿糖0.56~5.0毫摩/24小时,
羟脯氨酸114~330微摩/24小时,
蛋白20~80毫克/24小时,
枸橼酸0.36~2.39毫摩/24小时,
尿酸性黏多糖24~40毫克/24小时。
另外尿液中还含有多种微量元素及尿酶。
尿液成分与尿石形成有极为密切的关系,有些成分是形成结石的主要成分物质,例如钙、尿酸、草酸等,有些成分则是形成结石的抑制物,例如枸橼酸、酸性黏多糖、镁等。
正常人尿液的主要成分是水,占96%~97%,固体成分占3%~4%。正常成人每天排出固体物质约60克,固体物质中无机盐约25克,其中一半是钠、氯离子;有机物约35 克,其中尿素约30克,其余是少量的糖类、蛋白及体内多种代谢产物。

详细:

https://www.baidu.com/s?wd=%E5%B ... TP2qrJ%2FlG%2B0%2F4



尿液:

http://www.baike.com/wiki/%E5%B0%BF%E6%B6%B2



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 楼主| 发表于 2017-5-17 11:09:32 | 显示全部楼层
本帖最后由 邓文龙 于 2017-5-17 12:03 编辑

作者:David Wishart

来源:《PLoS综合》

发布时间:2013-9-11 10:24:16

人尿含三千多种化学物质

加拿大的一个科研小组日前报告说,经过7年多的研究,他们发现人体尿液中含有超过3000种化学物质。确定尿液的化学成分,对于有针对性地改善人体健康具有长远影响。

人体尿液蕴藏着人体健康、饮食与环境污染物接触等方面的关键信息,其在医学研究方面的历史已有3000多年。直到19世纪晚期,尿液的色与味还是医生看病的主要手段之一。

加拿大艾伯塔大学研究人员在新一期美国期刊《科学公共图书馆—综合卷》上报告说,他们利用多种先进的分析化学技术,结合文献资料,对22名健康志愿者的尿液进行分析检测,共发现了3079种化学物质。

研究负责人、艾伯塔大学教授戴维·威舍特说:“尿液极其复杂。我们没想到会有这么多种不同的化学物质进入尿液。”(中文来源:新华社 林小春)
  
更多阅读
  
《PLoS综合》发表论文摘要(英文)

(软件译)

研究论文

人类尿代谢组

Souhaila Bouatra, Farid Aziat, 鲁帕斯里·曼达尔 安志国, 迈克尔·威尔逊 克雷格诺克斯, 特伦特·Bjorndahl, Ramanarayan Krishnamurthy, Fozia Saleem, 刘菲, Zerihun T. Dame, 珍娜·波泽尔 杰西卡·胡恩(Jessica Huynh)  [...] David S. Wishart [ 查看全部 ]

人类尿代谢组
Souhaila Bouatra,
Farid Aziat,
鲁帕斯里·曼达尔
安志国,
迈克尔·威尔逊
克雷格诺克斯,
Trent C. Bjorndahl,
...
PLOS X
发布时间:2013年9月4日https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073076

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尿液长期以来一直是代谢组学研究人员中“受青睐”的生物流体。它是无菌的,容易获得大量,大部分没有干扰蛋白质或脂质和化学复合物。然而,这种化学复杂性也使得尿液成为一个特别困难的基质,以完全理解。作为生物废物,尿通常含有来自各种食品,饮料,药物,环境污染物,内源性废物代谢物和细菌副产物的代谢分解产物。许多这些化合物的特征较差,知之甚少。为了提高我们对这种生物流体的理解,我们对人体尿液进行了全面,定量,代谢组学的表征。这涉及计算机辅助文献挖掘和综合,定量实验评估/验证。实验部分采用NMR光谱,气相色谱质谱(GC-MS),直流注入质谱(DFI / LC-MS / MS),电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)和高效液相色谱(HPLC)对多个人体尿样进行实验。这种多平台代谢组学分析使我们能够识别445和量化378种独特的尿代谢物或代谢物种。不同的分析平台能够通过NMR,179(85)通过GC-MS鉴定(量化)209(209),通过DFI / LC-MS / MS鉴定(量化)127(127),通过ICP -MS和10(10)。我们使用多种代谢组学平台和技术,使我们能够识别几种以前未知的尿代谢物,并大大提高代谢组学覆盖水平。它还允许我们批判性地评估不同平台或技术的相对优势和劣势。文献综述导致了另外2206种尿素化合物的识别和注释,并用于帮助指导随后的实验研究。包含一套完整的2651的在线数据库确认的人的尿液代谢产物的物种,它们的结构(以3079个),浓度,相关参考文献,并链接到他们的已知疾病关联是免费提供的http://www.urinemetabolome.ca

介绍

代谢组学是“omics”科学的一个相对较年轻的分支,涉及细胞和生物产生的化学产品或代谢物的系统研究。因为代谢物是许多全基因组或蛋白质组的相互作用的下游产物,代谢组(生物体中所有代谢物的总和)可以是生物体表型的非常敏感的测量。这一事实使代谢组学在环境 - 基因相互作用研究中特别有用[1],[2],[3],[4],疾病生物标志物的鉴定[5],[6],[7],[8 ] ],[9]和药物的发现[10]。不同于其基因组或蛋白质组的完整或近乎完整覆盖的较旧的“omics”表兄弟是相当常规的,代谢组学仍然在努力覆盖甚至少部分代谢组。事实上,大多数人的代谢物组学的研究发表在今天,甚至那些利用最新的,最敏感的LC-MS / MS技术,典型地在鉴定或表征少于100种化合物成功[11] ,[12] ,[13] ,[14] 。这相当于已知人类代谢组的小于1%[15],[16]。为了帮助改善这种情况,我们(和其他人)开始对各种人类生物流体代谢组织进行系统表征。这包括人类脑脊液代谢组胺[17],[18],人类唾液代谢组[19]和人血清代谢组[20]。我们现在已经把我们的注意力转移到描绘人类尿液代谢组学。

由哺乳动物产生的尿液是由肾产生的透明的,无菌的琥珀色液体。肾脏从血液中提取可溶性废物,以及过量的水,糖和各种其他化合物。所产生的尿含有高浓度的尿素(来自氨基酸代谢),无机盐(氯化物,钠和钾),肌酸酐,氨,有机酸,各种水溶性毒素和血红蛋白分解的着色产物,包括尿胆素,其给予尿其特征色。排尿是身体消除水溶性废物的主要途径。平均成年人每天产生1.5-2.0升尿液,在一生中,足以填补一个小的后院游泳池(5 X 8 X 1.5米)。

虽然在很大程度上被视为废物,但尿液作为诊断性生物流体具有相当大的价值。事实上,用于医疗用途的尿液分析可追溯到古埃及[21],[22],[23],[24]。希波克拉底分子在很大程度上使尿检的医学实践(医学诊断的尿液研究)合法化,其中使用颜色,浑浊,气味甚至尿味的检查来鉴定各种疾病。在整个拜占庭时代和中世纪,尿液轮(将尿液颜色与特定疾病相关联的图表)通常被医生用于诊断[21],[25]。褐色表示黄疸,红色色调(血液)可能表示尿路肿瘤,没有颜色将表示糖尿病,泡沫性尿液将表示蛋白尿。随着在19的中部现代临床技术的出现个世纪,尿检基本消失。然而,尿液仍然是现代医学实践的重要基石。事实上,这是第一个用于临床诊断人类遗传疾病 - 生物色素沉积的生物流体[26]。即使在今天,尿液分析也常规进行,可以轻松测量尿糖,胆红素,酮体,硝酸盐,白细胞酯酶,比重,血红蛋白,尿胆素原和蛋白质。更详细的尿分析也可用于研究各种肾脏疾病,如膀胱,卵巢和肾脏疾病[27],[28],[29],[30]。

作为一种重要且易于获取的生物液体,尿液已经是100多年的详细化学分析的主题[31],[32]。正常参考范围的广泛表已发表了100根多尿离子和代谢物[33] ,[34] ,[35] ,[36] ,[37] 。除了这些参考临床化学研究之外,几组已经对尿液应用了各种“全局”代谢组蛋白或代谢物分析方法,如高分辨率核磁分辨(NMR)光谱[38],[39],[40],高性能液相色谱(HPLC)[41],高效液相色谱 - 串联质谱(HPLC-MS / MS)[42],超高效液相色谱 - 高分辨率轨道质谱(UHPLC-HRMS)[43],超高高效液相色谱(UPLC-RP)[31],[44],与质谱联用的快速原子轰击电离(FAB-MS)[35],连接四极质谱(GCxGC-MS)的二维气相色谱[32 ]或飞行时间质谱(GCxGC-TOF-MS)[37],纳流液相色谱 - 电喷雾离子化 - 串联质谱(LC-ESI-MS / MS)[33]和液相色谱与电喷雾四倍时间飞行质谱(LC / QT OF-MS)[36]。许多研究组也使用两种或多种分析方法的组合来帮助改善代谢物覆盖[34],[40]。

用于分析尿液和通过这些方法鉴定和/或定量的代谢物数量的综合列表(以及参考文献)列于表1。从该表可以看出,(临时)可以在人尿中鉴定多达294种不同的代谢物。然而,量化有些困难,人尿中有报道的量化代谢物数量最多,略低于100.除了这些全球代谢组学研究之外,还对人类进行了数百种其他“靶向”或单代谢物研究尿液导致了数百种其他尿液代谢物的鉴定和定量。不幸的是,这些信息不在任何中央存储库中。相反,它分散在许多教科书和期刊上[16]。

尿中代谢物浓度 - 文献调查

除了本研究获得的实验得到的值之外,尿代谢组学数据库(UMDB)还提供文献衍生的尿代谢物浓度,参考PubMed ID或临床教科书。在许多情况下,为“正常”条件给出多个浓度值。这样做可以为用户/读者提供不同技术或实验室可能测量的潜在浓度差异的更好估计。作为一般规则,大多数实验室和方法之间存在很好的一致性。然而,UMDB中提出的文献结果并不反映原始文献的真实状态。被认为是错误的(通过后续发表的研究),错误的或生理上的不可能之后,通过策划过程消除了一些文献导出的浓度值。大部分策展过程涉及多位策展人仔细阅读和重新阅读主要文献,以检查单位类型,单位转换和印刷不一致性。

除了钠(14.7±9.0mM / mM肌酐平均值),氯(8.8±6.2mM / mM肌酸酐),钾(4.6±0.1mM / mM肌酸酐),氨(2.8±0.9)尿素(22.5±4.4 mM / mM肌酐),肌酐(10.4±2.0 mM),马尿酸(298.5±276.8μM/ mM),尿中的4种最丰富的有机代谢产物(以平均值计)肌酸酐)和柠檬酸(280.6±115.2μM/ mM肌酸酐)。尿中最少(可检测)的代谢物包括催产素(0.9±0.1pM / mM肌酸酐),血管紧张素II(1.2±0.2pM / mM肌酐),15-脱氧-D-12,14-PGJ2(2.3±1.0pM / mM肌酐)和褪黑激素(3.3±2.7 pM / mM肌酐)。这表明目前尿液中代谢物的检测下限为低pM / mM肌酐范围,尿中分析物的浓度范围为近11个数量级。

一个特别有趣的一点是,正常尿液中平均代谢物的浓度(按肌酐计算)变化约±50%,一些代谢物变化多达±350%(如正丙肾上腺素(0.00085±0.00317) (0.03±0.07μM/ mM肌酸酐),二十二烷(0.032±0.072μM/ mM肌酸酐),钨(0.010±0.022μM/ mM肌酸酐)和绿原酸(0.0014±0.0029μM/ mM肌酸酐) ),因此得出结论,潜在的疾病生物标志物没有适当地考虑到这种变化是不明智的,我们认为这些相对较大的代谢物浓度范围是由于许多因素,包括年龄,性别,遗传背景,昼夜变化,健康状况,活动水平和饮食[56],[57],[58],[59]。事实上,一些UMDB条目明确显示了基于这些代谢物浓度 显然,对于观察到的尿液变化的贡献显然更多的研究是有必要的,尽管有几千种代谢物可以测量几十种情况,但这些研究显然需要大量的技术和人力资源。

尿代谢物的实验定量和鉴定 - NMR

来自健康个体的尿液的代表性高分辨NMR谱如图1所示。从该图可以看出,尿NMR光谱非常富有信息,令人惊奇的复杂,数千个分辨峰。从分析的22个健康对照尿液样品中,我们可以鉴定出209种独特化合物,每种样品平均鉴定出167±19个化合物。使用光谱拟合(通过Chenomx)和/或具有真实标准的尖峰实验,明确地鉴定和量化每种化合物。每个代谢物的浓度标准化为每个尿液样本的相应肌酐值,以补偿尿量的变化(代谢物的浓度表示为μM/ mM肌酐)。

图1.来自人尿的尿液的典型500MHz 1 H-NMR光谱。
数字表示以下代谢物:1:肌酐; 2:柠檬酸 3:甘氨酸; 4:甲酸; 5:甲醇; 6:胍基乙酸; 7:乙酸; 8:L-半胱氨酸; 9:乙醇酸; 10:肌酸 11:异柠檬酸 12:马尿酸 13:L-谷氨酰胺 14:L-丙氨酸; 15:L-赖氨酸 16:葡萄糖酸 17:2-羟基戊二酸; 18:D-葡萄糖 19:硫酸吲哚 20:三甲基-N-氧化物; 21:乙醇胺; 22:L-乳酸 23:牛磺酸 24:L-苏氨酸 25:二甲胺; 26:焦谷氨酸; 27:葫芦巴 28:蔗糖; 29:三甲胺; 30:甘露醇 31:L-丝氨酸 32:丙酮 33:L-胱氨酸; 34:己二酸; 35:L-组氨酸 36:L-酪氨酸; 37:咪唑; 38:扁桃酸 39:二甲基甘氨酸 40:顺式酸 41:尿素 42:3-(3-羟基苯基)-3-羟基丙酸(HPHPA); 43:苯酚; 45:异丁酸 46:甲基琥珀酸; 47:3-氨基异丁酸 48:L-岩藻糖 49:N-乙酰天冬氨酸 50:N-乙酰神经氨酸; 51:乙酰乙酸 52:α-氨基己二酸; 53:甲基胍; 54:苯乙酰谷氨酰胺。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073076.g001

基于这些NMR研究,来自健康个体的尿液中最丰富的成分(基于平均值)为尿素(12.3±14.5mM / mM肌酐),肌酐(14.7±9.8mM),马尿酸(229±160μM/ mM肌酸酐)和柠檬酸(203±129μM/ mM肌酸酐)。最少量的化合物是反式阿魏酸(1.2μM/ mM肌酸酐),磷酸胆碱(1.1±0.7μM/ mM肌酸酐),4-乙基苯酚(0.9±0.1μM/ mM肌酸酐),2-甲基戊二酸(0.8±0.4μM / mM肌酸酐)。使用NMR可以可靠地检测到的最低浓度为0.4±0.1μM/ mM肌酸酐(对于马来酸),0.5±0.2μM/ mM肌酸酐(对于α-酮异戊酸和N-乙酰泼尼锡)和0.7±0.4μM/ mM肌酐(富马酸)。平均化合物浓度(包括其范围),文献报告浓度(健康成人)及其发生频率的完整列表如表3所示。通常,NMR测量浓度与文献报道的浓度(通常通过其他分析技术获得)之间存在很好的一致性。

然而,并非所有NMR衍生的尿浓度与文献派生值一致。总共34种化合物的平均浓度比先前报告的值(例如,1,3-二甲基尿酸,葡糖二酸,L-天冬氨酸,甘露醇)高一些(> 1SD),而21种化合物的平均浓度较低(< 1 SD)比以前报道的(例如,1-甲基组氨酸,苯酚,二氢胸腺嘧啶,胸苷)。另外7种代谢物也显示出比文献中以前报道的浓度范围更大的浓度范围。这些包括:乙酸,丁酸,异戊酸,乳糖,苯基乙醛酸,脯氨酸 - 甜菜碱和反式阿魏酸。这些差异中的一些可能是由于饮食,生理状态,药理作用和所分析的不同群体的年龄差异。其他差异可能是由于储存效应,样品制备方法和使用的分析方法。通常,NMR浓度测定非常精确,因为它们涉及对化合物的直接测量,而不是衍生化合物的间接测量。因此,我们对表3中报告的NMR浓度值非常有信心,并且倾向于将其视为比通过其他技术测量的那些更可靠。

显示高于或低于报告浓度的许多化合物似乎与饮食摄入有关。例如,甘露糖醇是人类吸收不良的糖醇,但其在尿液中的存在可以通过其在常见食物如苹果,菠萝,芦笋和胡萝卜中的发生来解释。同样,摄入早餐谷物[61]和巧克力后,阿魏酸(多酚衍生物)的尿液排泄量也会增加。我们测量的相对较低的值可能是由于在特殊饮食中测量了表3中所报告的跨阿魏酸的文献价值[62]。此外,我们在尿中测量的低水平的脯氨酸 - 甜菜碱可能是由于我们的人口样本中接触柑橘类水果的频率较低[63]。脯氨酸 - 甜菜碱是在柑橘类水果中发现的渗透保护剂,在消耗了诸如橙汁的水果后,该代谢物的尿液排泄量增加[64]。类似地,我们在尿液中检测到的较高水平的二甲基砜可归因于含有DMSO的饮食来源[65]。例如,洋葱含有许多亚砜,包括DMSO,可在肝脏和肾脏中氧化生成二甲基砜[66],[67]。报道在1-甲基组氨酸情况下,肉类的消费量也可以显着增加尿液中一些代谢物的浓度[68]。1-甲基组氨酸是由通常在肉类中发现的丝氨酸(二肽)的代谢产生的[69],[70]。除了饮食之外,尿液中的代谢物水平也可能受生理状态的影响。例如,尿中3-羟基丁酸的水平在禁食期间增加,并且可以在0至200μM/ mM肌酸酐的范围内,文献中报告的最大水平(200μM/ mM肌酐)对应于健康男性35小时后禁食[50]。

我们通过NMR测量的一些代谢物没有任何先前报道的文献值。例如,葡萄糖醛酸通常报告为水解后的总葡萄糖醛酸(游离酸加葡萄糖醛酸苷共轭物)[71],[72]。这里我们报告了游离葡萄糖醛酸的浓度,如表3所示。另一个例子,2-甲基赤藓糖醇,以前在人尿中检测到,但没有报道浓度[73]。2-甲基赤藓糖醇的尿排泄很可能是含有2-甲基赤藓糖醇和/或2-甲基赤藓糖醇-4-磷酸的水果或蔬菜的饮食消耗的结果。2-甲基赤藓糖醇-4-磷酸酯是类异戊二烯生物合成中的一种中间体[74],已被发现在某些植物中相当丰富[75]。

我们通过NMR测量的许多化合物似乎是人类尿液的正常成分,但是似乎以前没有被报道可以通过NMR(总共42种化合物)检测到,或者通过任何其它方法报道但未被量化共8种化合物)。通过其先前通过GC-MS和DI-MS(参见以下部分)的鉴定以及通过其他方法先前在人尿中检测到的化合物的仔细文献分析,帮助鉴定这些“NMR-新”化合物。通过NMR化合物检测但未预先定量的列表包括:2-羟基-3-甲基戊酸,2-甲基-3-酮戊酸,2-甲基赤藓糖醇,葡糖醛酸,单甲基戊二酸,N-甲基乙内酰脲,磷酰胆碱和扇叶醇。所有这些化合物均使用真实标准确认。

该NMR研究还揭示了以前公布的基于NMR的人类尿代谢组学研究中发现的许多常见的鉴定错误。特别地,几个早期的报告鉴定了苯乙酰甘氨酸[76],N-乙酰谷氨酸[77],甲酚[78],异烟酸[78],黄色7.1 [79],间羟基苯基丙酸[80],2-氧代异己酸[ 81],尿布酸,甘氨酰脯氨酸和鸟氨酸[80]可通过人尿中的NMR检测。使用我们的NMR仪器和我们可用的样品,即使在使用正宗化合物进行多次穗试验后,我们也无法检测到这些化合物。据报道,这些代谢产物中的一些以前报告在人体尿液中,但其浓度远低于现代NMR仪器检测的下限(约为1μM)。由于它们的化学位移相似性,苯乙酰甘氨酸(仅在大鼠和小鼠中发现)和N-乙酰谷氨酸似乎通常被认为是苯乙酰谷氨酰胺。我们还注意到,异烟肼和肼衍生物的分解产物(仅在使用异烟肼和其他肼衍生物作为药物的个体中发现)似乎被误认为是三ine碱。甲酚(水不溶性)似乎经常被认为是甲酚硫酸盐(水溶性),而化合物黄7.1,间羟基苯基丙酸和3-(对羟基苯基) - 丙酸似乎通常被误认为是3 - (3-羟基苯基)-3-羟基丙酸(HPHPA)。

除了纠正这些化合物鉴定错误之外,我们还观察到我们的尿样中肌酐水平的一些显着的性别相关影响。由于男性通常骨骼肌的质量大于女性,所以她们的尿酸水平往往比女性高。这在我们的样品中是显而易见的,因为平均男性肌酸酐水平为20mM,而平均女性肌酸酐水平为11mM。此外,增加膳食摄入的肌酸或富含蛋白质的饮食可以增加每日肌酐排泄量[82]。

详细:

http://journals.plos.org/plosone ... ournal.pone.0073076

http://news.sciencenet.cn/htmlpa ... 30270.shtm?id=30270

 楼主| 发表于 2017-5-17 11:21:23 | 显示全部楼层
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《PLoS综合》发表论文摘要(英文)

(软件译)

研究论文

人类尿代谢组 2

图2.从人尿提取的水溶性代谢物的典型总离子色谱图。
数字表示以下代谢物(定量化合物):1:L-缬氨酸; 2:草酸 3:3-羟基异丁酸; 4:L-丝氨酸; 5:甘氨酸; 6:琥珀酸; 7:甘油酸 8:4-脱氧苏糖酸; 9:2,4-二羟基丁酸; 10:3,4-二羟基丁酸; 11:己二酸; 12:肌酐; 13:苏糖酸; 14:L-苯丙氨酸; 15:对羟基苯乙酸; 16:L-鸟氨酸; 17:L-天冬酰胺; 18:L-阿拉伯糖; 19:D-木糖醇; 20:D-木酮糖; 21:顺式/反乌头酸; 22:马尿酸 23:异柠檬酸 24:D-半乳糖; 25:D-葡萄糖; 26:L-酪氨酸; 27:山梨醇 28:葡萄糖酸 29:青霉烷醇 30:肌醇 31:尿酸 32:假尿苷。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073076.g002

图3.从人尿提取的有机酸的典型GC-MS总离子色谱图。
数字表示以下代谢物(定量化合物):1:丙酮酸; 2:L-乳酸; 3:α-羟基异丁酸; 4:乙醇酸; 5:乙酰丙酸 6:3-羟基异戊酸; 7:2-羟基-2-甲基丁酸; 8:羟基丙酸 9:2-甲基-3-羟基丁酸 10:丙二酸; 11:3-羟基异戊酸; 12:甲基丙二酸 13:2-乙基丙烯酸; 14:苯甲酸; 15:磷酸; 16:乙基丙二酸 17:琥珀酸; 18:甲基琥珀酸; 19:4脱氧苏糖酸; 20:5-羟基己酸; 21:柠康酸 22:戊二酸; 23:间氯苯甲酸; 24; 3,4-二羟基丁酸; 25:3-甲基戊二酸; 26:己二酸; 27:焦谷氨酸 28:3-甲基己二酸 29:sumiki的酸 30:邻羟基苯乙酸 31:氧戊二酸; 32:庚二酸 33:3-羟甲基戊二酸 34:3-羟基苯基乙酸 35:4-羟基苯甲酸 36:2-furoylglycine; 37:辛二酸; 38:喹啉酸; 39:顺式/反乌头酸; 40:高香草酸 41:壬二酸; 42:马尿酸 43:3,4-二羟基苯乙酸; 44:3-(3-羟基苯基)-3-羟基丙酸(HPHPA); 45:香草扁桃酸 46:4-羟基苯基乳酸 47:吲哚乙酸 48:棕榈酸; 49:犬尿酸 50:3-羟基磷酸; 51:3-羟基癸酸; 52:阿魏酸; 53:5-羟基吲哚乙酸 54:硬脂酸。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073076.g003

图4.来自合并的人尿样品的挥发性有机化合物(VOC)的典型气相色谱图。
数字表示以下代谢物:1:3-甲基环丁砜; 二点03己酮; 3点02戊酮; 4点01羟基-2-戊酮; 5:甲基硫代烯丙酯; 6:二甲基二硫醚; 7点04庚酮; 8时01甲基环己醇; 9; 2-己酮; 10:3,4二甲基噻; 11:二烯丙基硫化物; 12时05甲基-2-己酮; 13:1,3-二硫环己烷; 14:二甲基三硫醚; 15:苯酚; 16:欧司凡 17:对甲基异丙基苯; 18:甲基异丙基苯; 19:1,4桉树脑; 20:对甲酚 21:芳樟醇氧化物 22:异薄荷醇 23:α-对二甲基苯乙烯; 24:L-薄荷醇 25:十一烷 26:氧化铜(II); 27:水杨酸甲酯; 28:贝他酮 29:中音 30:o-百里酚 31:β-环磷酰胺; 32:4,7二甲基 - 苯并呋喃; 33:硬脂酸:34:2,6,10,10四甲基 - 氧杂 - 螺-4,5-癸-6-烯; 35:4-(2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-基)-2-丁酮; 36:1,2,3,4-四氢-1,1,6-三甲基萘; 37:阿尔卑斯; 38:1,2,3,4四氢-1,5,7- trimethylnapthalene; 39:1,2-diydro-1,1,6三甲基萘; 40:Beta-guaiene; 41:β-大马士革; 42:2,5环己二烯-1,4-二酮,2,6-二 - 叔丁基; 43:himachalene; 44:4-(2,6,6-三甲基环己基-1,3-二烯基) - 丁-3-烯-2-酮:45:1-(2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-基)-1-戊烯-3-酮; 46:2,4-双(1,1-二甲基乙基) - 苯酚; 47:1-(2,3,6-三甲基苯基)-3-丁烯-2-酮; 48:L-菖蒲 49:β-连环素; 50:1,6,7-trimethylnaphthalene; 51:azulol; 52:3,3,5,6四甲基-1-茚满酮。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073076.g004

尿代谢物的定量和鉴定 - 联合直接流动注射和LC-MS / MS测定

直接流注射(DFI)MS / MS或DFI-MS / MS是另一种常用的全球代谢分析方法[87]。当同位素标准与多重反应监测(MRM)一起使用时,也可以用非常精确的浓度测量来进行目标代谢组学。对于我们的尿液研究,我们采用联合DFI / LC-MS / MS方法,基于市售的AbsoluteIDQ p180试剂盒(BIOCRATES Life Sciences AG,​​因斯布鲁克)。当应用于尿液时,我们能够鉴定和量化总共127种代谢物或代谢物种,包括34种酰基肉碱,21种氨基酸,15种生物胺,肌酸酐,己糖,35种磷脂酰胆碱,15种鞘磷脂和5种溶血磷脂酰胆碱。通过LC-MS / MS方法分析氨基酸和生物胺,而所有其他代谢物通过DFI-MS / MS分析,如表7所示。DFI-MS / MS使用其总酰基/烷基链含量(即PC(38:4))鉴定脂质物质(与特定脂质相反),而不是其独特的结构。因此,由BIOCRATES试剂盒鉴定的每种脂质物种通常对应于5-10种可能的独特的脂质结构。因此,通过该方法鉴定的磷脂酰胆碱,鞘脂和溶血磷脂酰胆碱结构的总数分别为458,19和6。因此,将这些可能的脂质结构(总共483个,基于人血清中已知的脂肪酸和脂质组成)与其他72个确认的非脂质代谢物组合,DFI-MS / MS方法产生555个确认的和可能的代谢物或代谢物结构。所有这些化合物及其相应的估计浓度都已输入UMDB。
人类尿液的组成 - 与其他生物流体的比较

通过将系统的计算机辅助文献调查与广泛的定量多平台代谢组学分析结合起来,我们已经能够全面地表征人类尿代谢组学。我们的数据表明,人尿中至少有 3079个可检测的代谢物,其中1350个被量化。这些化合物中至少有72种是微生物来源的,1453种是内源性的,2282种被认为是外源性的(注意一些化合物可以是外源性和内源性的),来自饮食,药物,化妆品或环境暴露。使用为HMDB开发的化学分类系统[15],我们发现人类尿代谢物分为230种不同的化学类(25“超级类”,表2)。鉴于在整个人代谢组中只有356种化学类[16],这显然证明了尿液中发现的巨大化学多样性。可以预期,大多数尿代谢物是非常亲水的,尽管有明显的微量脂质和脂肪酸对尿代谢素(836脂肪酸和脂质)贡献了大量的化学物质。这与血清[20]的组成形成鲜明对比,其特别丰富的脂质(即> 17000种脂质和脂肪酸)。相对于其他生物流体如CSF [18]或唾液[19],尿含有显着更多的化合物(5-10X),显示出更多的化学多样性(2-3X)。另一方面,我们知道,在人体血液中也发现人尿中发现的每种化合物。换句话说,人体代谢组胺是组成和化学多样性方面人血清代谢组的一个子集[20]。然而,我们在尿中鉴定的超过484种化合物(通过实验或通过文献综述)以前没有报告为血液。事实上,这么多的化合物似乎对尿是独一无二的,这可能与肾脏从血液中浓缩某些代谢物的非凡工作有关。因此,远远低于血液中检测限的化合物(使用今天的仪器)远远高于尿液的检出限。事实上,对于某些化合物,例如组胺,雄酮,正丙肾上腺素,睾丸激素13,14-二氢-15-酮-PEGE2,m-酪胺和醛固酮,两种生物流体之间的浓度差异有时超过1000倍。因此,尽管血液和尿液中的水溶性化合物的数量可能几乎相同,但这些化合物的浓度通常是深远不同的。这种差异结合肾脏处理异常高或异常低浓度代谢物的能力,使得尿液成为医疗诊断的特别有用的生物流体。事实上,根据我们在UMDB中的数据,尿代谢物已被用于表征近220种疾病。此外,肾脏过滤毒素或异种生物的能力使尿液成为饮食和药物监测和评估化学或污染物暴露的特别有用的生物流体[96]。

结论

使用补充有广泛的计算机辅助文献调查的多个实验测定的组合,我们能够鉴定可以或已经在人尿中鉴定和/或定量的总共2651种代谢物或代谢物种类(相当于3079种不同结构)使用今天的技术。包括正常和异常(疾病或暴露相关的)代谢物的这些信息已经被放置在可公开访问的网络数据库中,称为尿代谢组数据库(UMDB)。为了评估文献数据的有效性,进一步研究现有代谢组学技术的能力,我们从22名健康志愿者对尿液进行了全面,定量的分析。在此分析中使用了共6种不同的平台:NMR,GC-MS,DFI / LC-MS / MS,ICP-MS,HPLC / UV和HPLC / FD。从这项实验工作,我们能够确定总共445个并量化378个代谢物或代谢物种。这对应于873个独特结构(识别)和806个独特结构(量化)。这里首次报道了53种化合物或化合物,作为人类尿液的正常组分,而77种化合物或化合物种类首次在人体尿液中被强力量化。我们实验鉴定和/或量化的所有代谢物已添加到UMDB中。根据UMDB中的信息,我们的实验获得的数据对应于人类尿代谢素的16%(如果包括可能的或推定的代谢物,则为28%)。

考虑到覆盖水平,化学物种的多样性以及可以进行分析的容易性,我们已经确定NMR光谱似乎是尿液全球或非靶向代谢组学分析的首选方法。另一方面,基于试剂盒的组合DFI / LC-MS / MS方法似乎对于目标代谢组学方法是最佳的。使用多管齐下的GC-MS方法进行尿代谢组学似乎在覆盖范围内非常有希望,但对于高通量分析来说不是理想的。本研究中使用的所有方法似乎与相对较小的复合重叠相互补充。这有力地表明,如果有足够的时间和资源可用,应在尿代谢组学研究中使用多种方法。

如果有其他资源可用,我们本来希望评估其他技术(GCxGC-MS,FT-MS,同位素标记的LC-MS),并比较这些方法可以获得的代谢物覆盖度和化学多样性水平。然而,这项研究并不意味着成为尿液或尿液代谢组学中的“最后”一词。相反,它应该被视为未来研究的一个起点,并且在这一领域的未来改进。事实上,我们进行这些研究和编制这些数据的主要目标是帮助推动定量代谢组学领域,特别是临床上重要的生物流体如尿液。在实验上,我们的数据应该作为比较其他技术的有用基准,并评估人类尿液表征中的即将到来的方法学改进。从临床观点来看,我们认为,人体尿代谢组学数据库(UMDB)中包含的信息应为代谢组学研究人员,临床医师和临床化学家提供方便,集中的资源,从中更多了解人体尿液及其独特的化学成分。

方法

道德声明

所有样品均按照大学健康研究伦理委员会批准的艾伯塔省大学授权的道德指南收集。所有个体年龄在18岁以上。所有人都使用认可的道德准则接触,同意参加本研究的人员必须签署同意书。所有与会者均提供书面同意。

尿液样本的收集

在120 mL无菌尿标本杯中,从22名健康成年志愿者(14名男性,8名女性)收集人体尿样(首次通过,早晨)。志愿者平均年龄30岁(女性19-65岁),男性平均年龄32岁(21-67岁)。收到后(通常在收集后1小时内),立即用叠氮化钠处理所有样品至最终浓度为2.5mM。在4000rpm离心10分钟以除去颗粒物质后,将尿液样品在-20℃下以2mL等分试样储存在猎鹰管中直至进一步使用。在每次分析之前,将样品在室温下解冻30分钟,并通过离心过滤第二次。

http://journals.plos.org/plosone ... ournal.pone.0073076



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